Desenvolvimento e validação de metodologias para determinação da capacidade antioxidante de carotenóides frente às espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio

Resumo

Os carotenóides são pigmentos naturais lipossolúveis que apresentam propriedades importantes para diversas funções biológicas contribuindo assim com ações benéficas em organismos vivos, como a diminuição do risco de desenvolvimento de diversas desordens crônico-degenerativas. Estas ações estão relacionadas com a redução ou inibição de reações deletérias de oxidação, através do seqüestro de espécies reativas de oxigênio (ROS) e de nitrogênio (RNS) produzidas em excesso pelo organismo. São escassas na literatura metodologias adequadas para determinar a capacidade antioxidante de carotenóides por mecanismos de desativação das ROS e RNS mais comumente encontradas em sistemas biológicos. Tal dificuldade deve-se ao fato de que a grande maioria dos métodos existentes terem sido desenvolvidos com o objetivo de avaliar a atividade de compostos hidrofílicos, ou devido a interferências dos carotenóides com as sondas utilizadas para detecção das espécies reativas, superestimando os valores encontrados de fluorescência, quimiluminescência ou colorimetria. O objetivo do presente projeto é o desenvolvimento e validação de metodologias por fluorescência, quimiluminescência ou colorimetria para a determinação da capacidade de desativação de ROS e RNS com interesse biológico por carotenóides. Após desenvolvimento e validação das metodologias, serão estudados os diferentes carotenóides para compreensão da relação entre características estruturais e capacidade antioxidante. Além disso, os compostos de degradação derivados dos carotenóides em decorrência das reações de oxidação induzidas pelas ROS e RNS serão caracterizados por cromatografia líquida de alta eficiência conectada aos detectores de arranjo de diodos e de massas (HPLC-DAD-MS/MS).