Avaliação da biodisponibilidade de peptídeos de proteínas de tremoço, feijão caupi e amaranto por permeabilidade em células Caco-2 e alterações na expressão gênica de transportadores relacionados à absorção intestinal de colesterol

Resumo

As proteínas presentes em algumas leguminosas e outros grãos vêm recebendo grande atenção por apresentarem propriedades relevantes e funcionais, principalmente relacionadas ao metabolismo do colesterol. Entretanto, sua biodisponibilidade e, particularmente, seu mecanismo de absorção intestinal não são bem compreendidos. O presente trabalho tem por objetivo avaliar a biodisponibilidade de proteínas de tremoço branco (Lupinus albus), feijão caupi (Vigna unguiculata L. Walp) e amaranto (Amaranthus cruentus L.), em modelo de enterócito humano (células Caco-2). As proteínas serão submetidas à hidrólise fisiológica, que simula a digestão protéica no organismo, e também por hidrólise industrial, utilizando a enzima alcalase (origem microbiana) visando o aperfeiçoamento de tecnologias de processamento de alimentos. Os hidrolisados protéicos serão analisados por SDS-PAGE, HPLC e LC/MS/MS. A biodisponibilidade dos hidrolisados protéicos será avaliada por experimentos de permeabilidade in vitro, utilizando a linhagem celular Caco-2 em placas transwell. Os produtos finais (permeatos) de ambas as condições experimentais serão caracterizados por HPLC e LC/MS/MS. Também será avaliada a expressão dos genes NPC1L1, ABCG5, ABCG8, ABCA1 e ABCG1, em células Caco-2, com a finalidade de elucidar o possível envolvimento dos peptídeos dos hidrolisados na modulação de genes envolvidos na homeostase de colesterol intracelular e sua relação com efeitos biológicos in vivo previamente descritos. Através desse trabalho, pretendemos detectar quais as frações de peptídeos que realmente são bioacessíveis, absorvidas pelos enterócitos e entram na corrente sanguínea e atingem os tecidos alvo, promovendo seu efeito funcional. Isso possibilitará a melhor utilização destas proteínas e suas frações bioacessíveis em formulações ou como parte de alimentos industrializados. (AU)