Caracterização funcional das proteínas de ligação ao RNA Lin28 e Msi1 nos processos de neurogênese

Resumo

Células-tronco neurais são consideradas os novos potenciais terapêuticos para as doenças neurodegenerativas e lesões de médula pela sua capacidade de se auto-renovar, proliferar e diferenciar dando origem a novas células neurais capazes de migrar para regiões de danos e repor o tecido danificado. No entanto, a compreensão do processo de diferenciação das células tronco neurais é crucial para desenvolver novas terapias celulares. Alterações da expressão gênica são requeridas para as mudanças fisiológicas e morfológicas necessárias para a diferenciação celular. Apesar de inúmeros processos como remodelamento de cromatina e regulação da transcrição estarem envolvidos, o papel da regulação pós-transcricional é absolutamente crítico. Neste contexto, a atividade dos miRNAs e proteínas de união a RNA tem que ser destacado, uma vez que funcionam como principais reguladores de processos como processamento de RNA, splicing, estabilidade, transporte e tradução. Entre as proteínas de união a RNA envolvidas em neurogênese, devemos destacar Musashi1 (Msi1) e Lin28. Ambas proteínas são altamente expressas em células tronco e necessárias para auto-renovação. A expressão dessas proteínas deve ser reprimida para que a diferenciação neuronal aconteça. Lin28 e Msi1 estão envolvidas em metabolismo de miRNA e regulação de tradução. Neste projeto, pretendemos investigar as funções de ambas as proteínas em neurogênese usando métodos bioquímicos, moleculares e genômicos. Mais precisamente, iremos mapear genes (targets) regulados por cada proteína pela metodologia CLIP e estudar a integração com parceiros proteicos identificados por estudos de proteoma e análise de duplo-híbrido. A soma dos resultados obtidos poderá elucidar o mecanismo de regulação, bem como, desvendar novas funções destas proteínas. (AU)