Regulação epigenética em células mesenquimais humanas

Resumo

Nos últimos anos, estudos com o uso de células-tronco mesenquimais (MSCs) na terapia regenerativa têm trazido resultados promissores, embora ainda limitados. Alguns limites esbarram no conhecimento relativo da biologia básica destas células, inclusive no que se refere à regulação epigenética, no estado de indiferenciação e multipotencialidade celular. Dentre os vários mecanismos de controle epigenético, os processos de metilação e desmetilação do DNA, quer sejam globais ou em genes envolvidos na manutenção da indiferenciação e multipotencialidade celular, são extremamente relevantes dentro deste contexto. O entendimento desta dinâmica nestas células poderá contribuir para o avanço no conhecimento biológico do que se conhece como saúde e desenvolvimento humano e ainda ser usado no processo de regeneração celular e tecidual. Para investigar esta dinâmica, serão utilizadas MSCs humanas indiferenciadas derivadas da medula óssea e do ligamento periodontal, dois tipos de meios, um com soro fetal bovino e outro sem. A relação entre as enzimas envolvidas na metilação e desmetilação do DNA, DNMT1/3a/3b e TETs respectivamente, e genes que codificam fatores de transcrição como o OCT4 e NANOG, envolvidos na manutenção da indiferenciação e multipotencialidade celular, serão estudados in vitro. Para tanto, um agente inibidor de DNMT1 (RG108), será utilizado. Diferentes técnicas que proporcionam o perfil de metilação do DNA, quer seja global ou gene específico, expressão gênica e proteica, atividade enzimática, além de análises de multipotencialidade, indiferenciação, proliferação, viabilidade e morte celular servirão ao propósito do projeto. (AU)