Desenho e síntese de inibidores irreversíveis da glicose-6-fosfato desidrogenase baseados em esteróides para mapear o sítio de ligação

Resumo

A Glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH) é uma importante enzima de regulação metabólica associada com desordens como obesidade, doenças cardiovasculares e câncer. A G6PDH também é essencial à sobrevivência do parasita Trypanosoma, o agente etiológico da doença de Chagas. DHEA (deidroepiandrosterona), um esteroide endógeno, e moléculas relacionadas são conhecidos por inibirem a G6PDH de um modo incompetitivo. Até hoje, não há relatos sobre o isolamento de complexos ligante-enzima, portanto, o sítio alostérico de ligação do esteroide ainda não foi identificado. Neste projeto, pretendemos sintetizar uma série de cerca de 40 análogos de esteroides possuindo uma porção eletrofílica, com a perspectiva de formar-se uma ligação covalente com um dos resíduos de aminoácidos nucleofílicos da G6PDH próximo ao sítio de ligação. O objetivo é conseguir isolar os adutos por técnicas de cristalização, e analisar estas estruturas por cristalografia de raios X e/ou espectrometria de massas para identificar as características estruturais dos ligantes para promover inibição. Tal realização permitiria primeiramente entender qual o mecanismo de interação molecular dos esteroides com a G6PDH, e possibilitaria o desenho e o desenvolvimento de novos inibidores. Também forneceria informações adicionais para o estudo compreensivo de desordens relacionadas à G6PDH. Sendo assim, esta proposta envolve uma aproximação multidisciplinar combinando síntese orgânica, biologia molecular, cristalografia de raio X, bem como espectrometria de massas para mapear o sítio específico do esteroide na G6PDH. (AU)