Efeitos de interações proteína-meio aquoso em modificações estruturais da L- Asparaginase II de escherichia coli

Resumo

A L- Asparaginase é uma enzima aplicada para o tratamento de diversos tipos de câncer, principalmente, a Leucemia Linfoide Aguda. Comercialmente, é produzida pelos micro-organismos Escherichia coli e Erwinia chrysanthemi pela indução da produção da proteína nativa ou pela expressão da proteína recombinante. A enzima catalisa a conversão da L- asparagina em L- aspartato e amônia, privando a célula tumoral de um aminoácido essencial para o seu crescimento. As versões disponíveis no mercado para tratamento passam por um processo de produção que requer melhorias. A formação de agregados proteicos é um dos principais problemas que afetam a formulação da L- Asparaginase. Estes podem dificultar a purificação da proteína bioativa, causar a perda da atividade proteica e até provocar o aumento da resposta imune ao biofármaco. O presente projeto terá o objetivo principal de analisar o comportamento da proteína L- Asparaginase em diferentes Sistemas Aquosos bifásicos (SAB), similares ao meio orgânico, e os fatores que regem a sua agregação. As polarizabilidade/dipolaridade, acidez e basicidade da L- Asparaginase serão estimadas por meio de análise solvatocrômica e geração de descritores para esta enzima. Os efeitos de mutações sítio-dirigidas na proteína também serão avaliados em SAB. Os resultados poderão auxiliar a compreensão de funções biológicas e transporte de proteínas, e otimizar o desenvolvimento de biofármacos. (AU)