Efeitos da capsaicina na etapa de iniciação da carcinogênese química de colón em ratos

Resumo

A capsaicina (8-metil-N-vanilil-trans-6-nonamida), um composto alcaloide lipofílico com propriedades antibacterianas, anti-inflamatórias e antioxidantes, é o principal componente responsável pela pungência em pimentas vermelhas. Neste projeto, investigaremos se a capsaicina possui potencial quimioprotetor quando administrada na etapa de iniciação da carcinogênese de cólon induzida pela 1,2-dimetilhidrazina (DMH). Ratos Wistar machos serão randomicamente alocados em seis grupos (10-15 animais cada). Durante as quatro primeiras semanas será fornecida ração basal e ração basal contendo 0,25% e 0,05% de capsaicina aos grupos 1 e 6, 2 e 4 e 3 e 5, respectivamente. No final da segunda semana, todos os animais receberão quatro injeções subcutâneas de DMH (grupos 1-3, 40mg/kg) ou EDTA (grupos 4-6, veículo do DMH), duas vezes por semana. Ao término da quarta semana, todos os animais receberão ração basal e água ad libitum até o final do experimento. O sangue periférico será coletado por sangria do plexo retro-orbital, 4 e 12 horas após a última administração da DMH, para condução do teste de genotoxicidade pelo ensaio do cometa. Cinco animais de cada grupo serão sacrificados 24 horas após a última administração da DMH. Fragmentos do cólon e do fígado serão coletados e armazenados em bioofrezer a -80ºC para extração de RNA, ou fixados em formaldeído 4% e armazenados em álcool 70% para posterior análise histopatológica e imunoistoquímica. As amostras de RNA serão analisadas pelo Taqman® Low Density Array (TLDA), para avaliar a expressão de 95 genes diferentes envolvidos no metabolismo oxidativo, atividade pró- e antioxidante, proliferação celular, dano e reparo de DNA e apoptose. Dez animais de cada grupo serão sacrificados ao término da vigésima segunda semana. Os cólons (medial e distal) serão removidos, fixados e armazenados em álcool 70%. Após a fixação, os cólons serão corados com solução 0,2% azul de metileno para detecção estereoscópica de Focos de Criptas Aberrantes (FCA, incidência e multiplicidade) e posteriormente processados para análises histopatológicas. Ao final deste estudo, espera-se estabelecer como a capsaicina pode modular o potential genotóxico e carcinogênico da DMH.