Identificação de patógenos primários isolados de infecção intramamária subclínica pela técnica de Espectrometria de Massas por Ionização e Dessorção à Laser Assistida por Matriz

Resumo

A hipótese do presente estudo é a de que a técnica de Espectrometria de Massas por Ionização e Dessorção à Laser Assistida por Matriz (MALDI-TOF MS) identifica de forma eficaz os patógenos primários causadores de infecção intramamária (IIM) subclínica quando comparado à cultura microbiológica. O presente estudo terá como objetivo a identificação dos patógenos primários (Staphylococcus aureus, Streptococcus ambientais, Streptococcus agalactiae, Escherichia coli e Klebsiella spp.) causadores de IIM subclínica por meio da técnica de MALDI-TOF MS. Para isso, serão selecionados seis rebanhos leiteiros (aproximadamente 600 vacas), nos quais serão selecionadas vacas em lactação (estimativa de 330 animais) com IIM subclínica causada por patógenos primários distribuídos em 5 grupos (1: Staphylococcus aureus; 2: Streptococcus ambientais; 3: Streptococcus agalactiae; 4: Escherichia coli; e 5: Klebsiella spp.). Das vacas envolvidas no estudo, serão selecionados 150 quartos mamários diagnosticados com IIM causada por patógenos primários. Além disso, será realizada uma segunda coleta de leite dos quartos mamários, os quais serão submetidos a contagem de células somáticas e identificação por cultura microbiológica. Após a identificação pela cultura microbiológica, será realizada extração em tubo das proteínas ribossomais dos isolados selecionados, para então, serem submetidos a leitura dos perfis proteicos (fingerprint) e identificação em nível de espécie bacteriana pela técnica de MALDI-TOF MS. Os resultados das duas técnicas serão comparados por meio do teste McNemar de proporções pareadas utilizando o programa estatístico S.A.S ® versão 9.2. Espera-se com o presente estudo, mostrar que a MALDI-TOF MS pode ser adotada como uma técnica laboratorial rotineira na identificação de patógenos causadores de mastite bovina. A MALDI-TOF MS proporcionará identificação rápida dos patógenos causadores de mastite possibilitando resultados rápidos aos produtores rurais, o que evitará assim tratamentos inadequados e, consequentemente, resistência aos antimicrobianos.