Análise de alterações induzidas por fator de crescimento no proteoma nuclear ao longo do ciclo celular de células tumorais de camundongo

Resumo

O núcleo contém proteínas essenciais para a manutenção e regulação do genoma transformando sinais extracelulares e intracelulares em alterações da expressão gênica e alterações fenotípicas. Neste projeto pretendemos realizar, em larga escala, análises comparativas e quantitativas do proteoma nuclear em diferentes fases do ciclo celular e na senescência de células tumorais de camundongo estimuladas com FGF2. Para tal, os extratos nucleares serão analisados sistematicamente por espectrometria de massas, o que permitirá investigar em maiores detalhes, proteínas intimamente relacionadas no gerenciamento da expressão gênica, do fenótipo celular, na mediação da replicação celular, no remodelamento da cromatina e no reparo e dano do DNA. Para as análises quantitativas, utilizaremos duas abordagens: Spike-in SILAC e quantificação do tipo label free. A partir de uma intensa análise por bionformática, integrando os dados aqui obtidos com dados da literatura, dados de vias de sinalização e demais informações públicas, acreditamos ser possível identificar moléculas-chave responsáveis pela indução e manutenção dos bloqueios no ciclo celular e na senescência induzidas por FGF2, além de permitir o melhor entendimento da biologia do ciclo celular e biologia tumoral. (AU)