Papel do NRF2 e HO-1 em pré-eclâmpsia: estudo de polimorfismos genéticos, fatores circulantes e ensaios in vitro

Resumo

A pré-eclâmpsia é a principal causa de mortalidade e morbidade entre as gestantes no Brasil e em vários países. A fisiopatologia desta doença é complexa e envolve vários processos. Um destes, amplamente validado na literatura, relaciona-se a um status oxidativo, onde há prevalência de produção de radicais livres e/ou redução da atividade antioxidante. Apesar destas evidências, a suplementação clínica com antioxidantes (vitamina C e E) não se demonstrou promissora em pré-eclâmpsia. Recentemente, vem sendo explorado como terapia em várias doenças, a ativação de um fator de transcrição, o NRF2 (nuclear factor, erythroid 2-like 2), que atua induzindo a transcrição de diversos genes que provem a proteção celular através da codificação de proteínas com atividade desintoxicante e antioxidante. Entre elas a hemeoxigenase (HO-1) é a mais estudada, pois apresenta efeitos antiapoptóticos, antioxidantes e citoprotetor. Até o momento, apenas dois estudos focando NRF2 foram realizados em pré-eclâmpsia, utilizando como material biológico placenta e citotrofoblasto. O presente projeto tem como objetivo comparar, entre gestantes saudáveis e pré-eclâmpsia (responsiva ou não a terapia anti-hipertensiva), as freqüências de polimorfismos nos genes que codificam o NRF2 e a HO-1, os níveis plasmáticos da HO-1 e da atividade antioxidante do plasma. Além disso, realizaremos estudos in vitro (modelo in vitro de pré-eclâmpsia) incubando o plasma dessas gestantes com células endoteliais e verificando: a expressão gênica e protéica do NRF2 e da HO-1, translocação do NRF2 ao núcleo (por luciferase e ELISA), validação dos achados com o uso de siRNA contra NRF2 e quantificação da expressão de microRNAs que regulam o NRF2. Também verificaremos a viabilidade celular e apoptose nestas células incubadas com o plasma dos diferentes grupos experimentais. Por fim, com o objetivo de ampliar a terapia na pré-eclâmpsia, será avaliado se a incubação com ativador de NRF2, o resveratrol (presente em grandes quantidades em uvas), poderia modular os resultados encontrados. Acreditamos que os dados obtidos neste projeto trarão informações relevantes para o estudo e terapia da pré-eclâmpsia no contexto mundial. (AU)