Regulação do promotor SMyHC III pelos receptores nucleares AR, GR e Coup-TFII: um trabalho solo ou conjunto?

Resumo

Os Receptores Nucleares (NRs) correspondem a uma superfamília de fatores de transcrição que podem ser regulados por ligantes, e atuam frente a regulação de genes específicos. O receptor órfão, Coup-TFII (Chiken ovalbumin upstream promoter-transcription factor) tem sido sugerido como um dos principais fatores envolvidos com o desenvolvimento cardíaco via controle do gene Slow myosin heavy chain 3 (SMyHC III). O promotor envolvido com o processo de controle da diferenciação atrial que ativa o gene SMyHC III porta em sua sequência um elemento complexo de resposta a receptores nucleares (ECRRN) composto por 33 pares de bases que contém sítios de ligação para NRs, tais qual o Coup-TFII. Estudos já realizados por nosso grupo de pesquisa, por meio de transfecção transiente, revelaram a ação ativadora do Coup-TFII sobre o promotor SmyHC III, ligando-se ao elemento ECRRN. Além disso, também foram realizados estudos prévios no qual evidenciaram diferenças na ativação do promotor sob diferentes combinações dos receptores de andrógenos (AR) e de glicocorticoides (GR) com o Coup-TFII, sugerindo um possível trabalho conjunto entre Coup-TFII, GR e AR. Dessa forma o presente estudo tem como objetivo avaliar, in vitro, interações proteína-proteína e proteína-DNA envolvendo os receptores AR, GRs e COUP-TFII e a possível relação entre seus papéis no desenvolvimento atrial, via regulação do SMyHC III. As análises para verificação da afinidade proteína-proteína e DNA-proteína serão realizadas por meio de experimentos de Anisotropia de fluorescência e, também, de Termoforese em microescala. A preocupação, bem como a possibilidade, em elucidar os diferentes mecanismos de regulação e as redes de interação dos NRs sobre o desenvolvimento embrionário cardíaco tem se mostrado crescente dentro do cenário científico, dada a grande importância biológica desse processo. Assim, os resultados a serem obtidos por meio do presente trabalho poderão contribuir para a elucidação dessas vias regulatórias, que atuam direta ou indiretamente com o processo biológico de diferenciação cardíaca atrial. (AU)