PURIFICAÇÃO DE ANTICORPOS MONOCLONAIS QUE RECONHECEM PROTEÍNAS SARS-CoV-2 VIA PRECIPITAÇÃO COM POLIETILENOGLICOL

Resumo

A doença coronavírus 2019 (COVID-19) é uma pandemia de saúde global caracterizada pela Organização Mundial de Saúde em 11 de março de 2020. Um dos pontos principais para sua contenção diz respeito ao diagnóstico da doença. Dentre os testes disponíveis, destacam-se os que fazem uso de anticorpos. Porém, para que os anticorpos possam ser utilizados, faz-se necessária sua purificação. A precipitação é uma das técnicas de purificação de bioprodutos mais tradicionais, e de baixo custo, relacionada com o princípio de redução da solubilidade de um soluto em um solvente, que culmina na formação do precipitado no meio em estudo. O polietilenoglicol (PEG) apresenta capacidade de precipitar biomoléculas a partir de um pequeno incremento em sua concentração e tem se demonstrado com desempenho satisfatório com anticorpos monoclonais (mAbs). Desta forma, este projeto de iniciação científica tem como objetivo avaliar a purificação de mAbs anti-covid 19, fazendo uso da precipitação com PEG, visando sua posterior aplicação em kits de diagnóstico. Serão levantadas curvas de solubilidade dos anticorpos utilizando PEG de diferentes massas moleculares (1500, 4000 e 6000) em diferentes valores de pH (6,0, 7,0, 8,0 e 9,0) para determinar as condições mais promissoras para a realização de precipitação em batelada. Serão determinadas as condições de ressolubilização de forma a se obter um mAb com pureza superior a 98%. Parâmetros como seletividade, rendimento e pureza serão determinadas serão determinados usando quantificação de mAbs e exclusão molecular em HPLC. Este projeto contribuirá para a literatura científica e para a indústria que atua no segmento de pesquisa e desenvolvimento neste campo, que utilizam sistemas clássicos e onerosos para a purificação de anticorpos, um componente chave em kits diagnósticos.