Produção de anticorpos monoclonais anti-IgG humana e sua purificação com precipitação

Resumo

Com o desenvolvimento deste projeto pretende-se realizar a produção de anticorpos monoclonais (mAbs) anti-IgG humana por meio da expansão em cultura dos clones, avaliando sua concentração e viabilidade. Posteriormente, visando a purificação por precipitação, serão determinadas as curvas de solubilidade do mAb anti-IgG com os agentes precipitantes PEG (4000 e 6000) variando sua concentração de 1% a 16% (m/v), cloreto de zinco (0 a 12 mmol L-1), e a combinação de ambos, utilizando tampões com pH 6,0, 7,0, 8,0 e 9,0. O teor de contaminantes e perfil proteico será analisado via HPLC. Por fim, serão realizadas precipitações em batelada nas condições experimentais mais promissoras obtidas com as curvas de solubilidade, seguida de determinação das melhores condições de ressuspensão para os precipitados (otimizações de tampão, com variação de pH entre 3,5 e 8,0 e proporção de diluição) e de sua viscosidade dinâmica, para definição das melhores condições de processo.