Avaliação da precipitação como técnica de recuperação e purificação de anticorpos policlonais anti-IgM humana a partir de soro de coelhos

Resumo

Este plano de trabalho de treinamento técnico visa a determinação do perfil proteico do soro de coelhos, com ênfase na concentração do anticorpo policlonal (pAb) anti-IgM humana. Posteriormente, serão determinadas as curvas de solubilidade do pAb anti-IgM com os agentes precipitantes PEG (4000 e 6000) variando sua concentração de 1% a 16% (m/v), cloreto de zinco (0 a 12 mmol L-1), e a combinação de ambos, utilizando tampões com pH 6,0, 7,0, 8,0 e 9,0. O teor de contaminantes e o perfil proteico serão levantados por HPLC. Um dos potenciais riscos é a ocorrência de coprecipitação de outras imunoglobulinas presentes no soro, que será monitorada e avaliada. Por fim, serão realizadas precipitações em batelada nas condições experimentais mais promissoras obtidas com as curvas de solubilidade, seguida de determinação das melhores condições de ressuspensão para os precipitados (otimizações de tampão, com variação de pH entre 3,5 e 8,0 e proporção de diluição) e de sua viscosidade dinâmica, para definição das melhores condições de processo.