Triagem de compostos para a identificação de fármacos contra o vírus Chikungunya utilizando sistema replicon subgenômico

Resumo

O vírus Chikungunya (CHIKV), causador da febre Chikungunya, é um arbovírus transmitido pelo mosquito Aedes aegypti, que periodicamente provoca epidemias ao redor do mundo. Desde o surto de 2014 no Brasil, o número de casos de infecção pelo CHIKV tem aumentado, podendo se tornar um sério problema de saúde pública. A infecção viral causa diversos sintomas, podendo resultar em artrite e distúrbios neurológicos. Entretanto, não existem vacinas ou fármacos contra o CHIKV que possam mitigar a disseminação do vírus e limitar a morbidade associada à doença. A identificação de agentes antivirais de forma rápida e eficiente depende de ensaios celulares/bioquímicos que possam ser realizados em modo de triagem de alta performance (high-throughput screening, HTS), como os ensaios baseados em replicon. Estes são sistemas subgenômicos nos quais os genes codificadores das proteínas estruturais são substituídos por uma proteína repórter, o que permite a identificação de inibidores da replicação viral de forma segura, uma vez transfectados em células suceptíveis. Neste projeto, utilizaremos a linhagem replicon repórter de CHIKV, denominada BHK-21-Rep-T7-Gluc-nSP-CHIKV-99650, para a triagem de grandes bibliotecas de pequenas moléculas em formato HTS. As células expressam o replicon subgenômico do vírus contendo o gene da Gaussia luciferase (Gluc) como repórter e da neomicina fosfotransferase (Neo), para manutenção deste sistema de forma estável no citoplasma. Este projeto está vinculado ao CEPID CIBFar da FAPESP e tem por objetivo a identificação de potenciais agentes anti-CHIKV, visando contribuir para o desenvolvimento de fármacos contra arboviroses emergentes.