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Identification and characterization of proteins involved in the regulation and development of orchid mycorrhizas

Grant number: 11/01727-6
Support Opportunities:Scholarships in Brazil - Doctorate
Start date: May 01, 2011
End date: February 28, 2014
Field of knowledge:Biological Sciences - Genetics - Molecular Genetics and Genetics of Microorganisms
Principal Investigator:Fernando Dini Andreote
Grantee:Rafael Borges da Silva Valadares
Host Institution: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brazil
Associated scholarship(s):12/06623-7 - Cell-specific gene and protein expression in a orchid mycorrhizal interaction., BE.EP.DR

Abstract

Orchidaceae é uma das famílias mais numerosas dentre as Angiospermas e várias espécies de orquídeas são caracterizadas por terem uma distribuição geográfica limitada. Orquídeas possuem sementes diminutas, que não possuem reservas para germinação. Na natureza, a germinação das sementes ocorre em simbiose mutualística com fungos micorrízicos, os quais transferem açúcares simples para os tecidos vegetais, possibilitando o desenvolvimento do embrião. Estes fungos pertencem a gêneros antes agrupados em Rhizoctonia, amplamente conhecido por sua patogenicidade em culturas agrícolas e florestais. Os mecanismos moleculares que controlam o desenvolvimento das micorrizas em orquídeas são desconhecidos, mas é provável que proteínas que se acumulam especificamente durante a simbiose mutualística (micorrizinas) sejam importantes para a regulação da mesma. O objetivo deste projeto é identificar e caracterizar proteínas envolvidas na regulação do desenvolvimento de micorrizas em orquídeas, através da análise comparativa dos proteomas e transcritomas de sementes germinando simbioticamente e assimbioticamente. Para isto, serão utilizados iTRAQ e 2D-DIGE, para a análise de proteínas. Serão realizadas extrações de proteínas em três diferentes estágios do desenvolvimento da micorriza orquidóide: "Mico-heterotrófico", onde o carbono assimilado pela plântula é provido exclusivamente pelo fungo micorrízico; "mixotrófico", onde parte do carbono assimilado pela plântula provem do fungo e parte é fixado via fotossíntese; e estágio autotrófico, onde a planta clorofilada não depende mais da micorriza para adquirir carbono. Adicionalmente, serão realizadas análises de ´13C, clorofila total e microscopia óptica em 6 intervalos de tempo durante o desenvolvimento da plântula, com o objetivo de acompanhar gradativamente a diminuição da dependência micotrófica. A análise proteoma de plântulas de orquídea poderá responder questões básicas sobre os mecanismos de regulação da interação planta-fungo e sua fisiologia.

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Scientific publications
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VALADARES, RAFAEL B. S.; PEROTTO, SILVIA; LUCHETA, ADRIANO R.; SANTOS, EDER C.; OLIVEIRA, RENATO M.; LAMBAIS, MARCIO R.. Proteomic and Transcriptomic Analyses Indicate Metabolic Changes and Reduced Defense Responses in Mycorrhizal Roots of Oeceoclades maculata (Orchidaceae) Collected in Nature. JOURNAL OF FUNGI, v. 6, n. 3, . (11/09637-6, 11/01727-6)