Cannabinoid receptor modulation of the glucose transporter protein GLUT4 in skeletal muscle cells line L6

• Grant number: 11/05715-2
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Scientific Initiation
• Start date: June 01, 2011
• End date: May 31, 2012
• Field of knowledge: Health Sciences - Medicine - Medical Clinics
• Principal Investigator: Daniela Tomie Furuya
• Grantee: Laís Ribeiro Hinz
• Host Institution: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil

Abstract

Na obesidade, o sistema endocanabinóide encontra-se hiper ativado, o que resulta em aumento dos níveis de endocanabinóides circulantes. O receptor canabinóide CB1 além de ser expresso no cérebro, é encontrado em tecido adiposo e músculo esquelético. Raros estudos apontam diferentes efeitos da ativação do sistema endocanabinóide sobre a captação da glicose em diferentes tecidos. Adicionalmente, recentes estudos in vitro obtidos em nosso laboratório demonstram que a inibição do receptor CB1 resulta em aumento expressivo do mRNA e da proteína GLUT4 em adipócitos. No entanto, em músculo esquelético, nada se conhece a respeito da modulação da expressão de GLUT4 pelo receptor CB1, e nem dos possíveis fatores de transcrição envolvidos. O presente projeto tem como objetivo verificar a modulação pelo receptor canabinóide CB1 na expressão de GLUT4, bem como o envolvimento do fator de transcrição SREBP-1, em cultura de células musculares. Para tanto, células musculares da linhagem L6 serão tratadas por 2 ou 4 horas com agonista seletivo do receptor CB1 (0,5 µM de ACEA), e/ou antagonista seletivo do receptor CB1 (0,5 µM AM251) e posteriormente, submetidas às seguintes análises: (1) expressão do mRNA de GLUT4, por PCR em tempo real (2) expressão da proteína GLUT4, por Western blotting, (3) ligação de SREBP-1 na região promotora do gene que expressa GLUT4, por Ensaio de Mobilidade Eletroforética (EMSA).