Identification of leucine responsive genes in immobilized skeletal muscle: a combined approach involving mRNA and microRNA sequencing

• Grant number: 18/21187-5
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Technical Training Program - Technical Training
• Start date: November 01, 2018
• End date: October 31, 2020
• Field of knowledge: Biological Sciences - Morphology - Anatomy
• Principal Investigator: Anselmo Sigari Moriscot
• Grantee: Gabriela Santos Lima Ambrósio
• Host Institution: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil
• Associated research grant: 15/04090-0 - Identification and caracterization of mechanisms involved in skeletal muscle mass control and regeneration, AP.TEM

Abstract

A atrofia muscular é considerada atualmente como um fator importante para a morbidade e mortalidade. Dessa forma, o desenvolvimento de estratégias que melhorem a capacidade muscular é de extrema importância. Nesse sentido, o nosso laboratório tem investigados os efeitos anti-catabólicos da leucina. A leucina é conhecida como um potente agente farmacológico com capacidade de atuar prevenindo o catabolismo em situações de atrofia muscular. Esse foi atribuído à redução da expressão gênica de componentes chaves do sistema proteolítico Ubiquitina-proteassoma, atrogin-1 e MuRF1. Por outro lado, é possível que outros fatores e vias de sinalização estejam envolvidos no efeito anti-atrófico de leucina. Portanto, o objetivo desse projeto é realizar um estudo prospectivo, utilizando a recente técnica de sequenciamento de mRNA em larga escala. Em sequencia seguiremos para a caracterização funcional de genes específicos. Apesar de recente, o sequenciamento em larga escala está bem estabelecido como uma ferramenta útil para a identificação de genes, vias e mecanismos responsivos, principalmente porque pode ultrapassar as pistas normalmente advindas do conhecimento adquirido em biologia celular e molecular. Do ponto de vista metodológico este projeto necessita de apoio constante em técnicas como PCR em tempo real, Western Blotting, cultura celular e imunofluorescência. Portanto o apoio de um bolsista TT2 se faz fundamental para que esses estudos possam avançar na velocidade esperada.