| Grant number: | 09/17360-4 |
| Support Opportunities: | Scholarships in Brazil - Scientific Initiation |
| Start date: | February 01, 2010 |
| End date: | January 31, 2012 |
| Field of knowledge: | Health Sciences - Dentistry |
| Principal Investigator: | Ana Carolina Magalhães |
| Grantee: | Luana Polioni Al-Ahj |
| Host Institution: | Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brazil |
Abstract De acordo com estudos, o fluoreto de titânio (TiF4) tem se mostrado mais eficaz em minimizar a erosão de esmalte e dentina em protocolos in vitro e in situ em comparação aos outros sais fluoretados. No entanto, para que este agente possa ser testado clinicamente com segurança, seria importante obter dados em relação a sua biocompatibilidade e a possíveis efeitos citotóxicos. Devido à falta de dados e à importância de estudos sobre citotoxicidade de agentes fluoretados potencialmente comercializáveis anteriormente ao seu uso clínico, o objetivo deste projeto será testar o efeito do TiF4 adicionado ao meio de cultura, em diferentes concentrações e em pH acidulado (pH 1,2) e tamponado (pH 6,8), na viabilidade e morfologia de fibroblastos NIH3T3 em comparação ao fluoreto de sódio (NaF, controle positivo) e ao meio de cultura convencional (sem agente fluoretado, controle negativo). Para tal, fibroblastos da linhagem NIH3T3 serão cultivados em meio de Eagle. As células serão mantidas durante 48h, sendo que o meio será trocado se houver mudança de cor durante este período, a 37ºC e à atmosfera de CO2 5%. Na seqüência, as células serão divididas em 9 grupos de acordo com as seguintes condições do meio de cultura: a) controle: meio de cultura (pH 6,8); b) meio de cultura com NaF 5,42% (2,45% F, pH 4,5); c) meio de cultura com NaF 5,42% tamponado (2,45% F, pH 6,8); d) meio de cultura com NaF 2,71% tamponado (1,225% F, pH 6,8); e) meio de cultura com NaF 1,355% tamponado (0,6125% F, pH 6,8); f) meio de cultura com TiF4 4% (2,45% F, pH 1,2); g) meio de cultura com TiF4 4% tamponado (2,45% F, pH 6,8); h) meio de cultura com TiF4 2% tamponado (1,225% F, pH 6,8); e i) meio de cultura com TiF4 1% tamponado (0,6125% F, pH 6,8). Os ensaios de citotoxicidade levarão em conta a viabilidade celular que será analisada pela redução do MTT, baseando-se na capacidade que a enzima succinato desidrogenase (presente nas mitocôndrias de células viáveis) tem de converter o sal de tetrazolium que é hidrossolúvel e de cor amarelada, em cristais de formazana que são de cor azul escura, indicando a atividade mitocondrial e conseqüente viabilidade celular. Outro método utilizado será a captação do vermelho neutro, que se baseia na aplicação de um corante que se concentra nos lisossomos. Em função da capacidade que os lisossomos possuem de absorver o corante, este teste indicará a distinção entre células viáveis, danificadas ou mortas. A avaliação da morfologia será realizada pela microscopia de luz, devendo ser descrita a morfologia geral das células, integridade da membrana, descolamento e lise celular. Os dados serão tabulados e submetidos à análise estatística (p<0,05). | |
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