Evaluation of paper based immunoassays in microzones created using wax printer.

• Grant number: 10/02504-8
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Scientific Initiation
• Start date: May 01, 2010
• End date: December 31, 2010
• Field of knowledge: Physical Sciences and Mathematics - Chemistry - Analytical Chemistry
• Principal Investigator: Emanuel Carrilho
• Grantee: Thiago Mazzu Do Nascimento
• Host Institution: Instituto de Química de São Carlos (IQSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brazil

Abstract

O presente projeto tem por objetivo avaliar a viabilidade do uso, e das possíveis aplicações, de ensaios imunológicos em papel, denominado P-ELISA, mostrando como estes são fabricados e quais as vantagens e desvantagens em sua utilização.Ensaios imunológicos utilizando o papel como plataforma de ensaio possuem um baixo custo, rapidez na realização do experimento e menor consumo de reagentes, se comparados com os métodos imunológicos convencionais, como o ELISA.A plataforma utilizada receberá padrões de cera impressos por uma impressora de cera convencional, que criarão microzonas no papel (96 poços). Para que esta seja distribuída uniformemente através do papel, será realizado um tratamento térmico, onde o aumento de temperatura derreterá a cera, que atravessará o papel. Após a secagem da cera, haverá a formação de um campo hidrofóbico que delimitará a área onde ocorrerá a reação, que será nos canais hidrofílicos criados.Será estabelecido um protocolo, que consiste em: a) imobilizar antígenos-alvo e seus anticorpos primários nas microzonas de papel; b) impedir a ligação de proteínas que não são de interesse nas zonas; c) lavagem das zonas, para remover o que não se ligou. Uma vez estabelecido o protocolo, será realizado o P-ELISA indireto para detectar anticorpos da classe IgG anti-toxoplasma gondii.