NLRC4 and NLRP3 inflammasome in periodontal disease induced by Aggregatibacter actinomycetemcomitans

Author(s)

Fernanda Regina Godoy Rocha

• Document type: Doctoral Thesis
• Press: Araraquara. 2016-06-06.
• Institution: Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Odontologia. Araraquara
• Defense date: 2016-04-08
• Advisor: Carlos Rossa Junior

Abstract

Inflamassomos são complexos multi protéicos capazes de amplificar o sinal inflamatório em condições de interações microbiota-hospedeiro e destruição tecidual, como a doença periodontal crônica. Devido à escassez de informações sobre o papel dos inflamassomos NLRC4 e NLRP3 na doença periodontal, utilizamos neste estudo um modelo de doença periodontal induzida por bactérias em camundongos WT, Ipafknockout (Ipaf-KO), Caspase 1-knockout (Casp1-KO) e NLRP3-knockout (NLRP3-KO) para descrever o efeito destes na inflamação e reabsorção óssea alveolar. Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa) inativadas pelo calor foram injetadas nos tecidos gengivais palatais adjacentes aos primeiros molares dos camundongos normais e knockout, e os grupos controle receberam o mesmo volume do veículo de suspensão (PBS). A severidade da reabsorção óssea foi quantificada por análise de μCT. A inflamação foi avaliada por imunofluorescência, verificando-se presença e intensidade da coloração por marcadores de leucócitos (CD45) e neutrófilos (Ly6G). O número de osteoclastos foi determinado por TRAP e a expressão gênica de RANKL, MMP-13, TNF-a, IL-6 e IL-10 nos tecidos gengivais avaliada por RT-qPCR. A publicação 1 mostra uma reabsorção óssea inflamatória significativamente maior nos camundongos Ipaf-KO, sem diferenças, porém, no número de osteoclastos entre WT e Ipaf-KO. A expressão dos genes-alvo aumentou com a indução da doença periodontal, exceto de TNFa e IL-10, que foram altas nos animais Ipaf-KO mesmo em ausência da doença periodontal, podendo-se concluir que o inflamassomo NLRC4 teve um papel protetor na reabsorção óssea inflamatória neste modelo experimental. Na publicação 2 observamos que a severidade da reabsorção óssea não foi afetada pela ausência do inflamassomo NLRP3, mas foi significantemente reduzida nos camundongos Casp1-KO, sendo acompanhada nestes por um aumento significante no número de osteoclastos. Não houve, no entanto, diferenças no infiltrado inflamatório ou na expressão dos genes-alvo, concluindo-se que NLRP3 não teve papel significante na inflamação e reabsorção óssea, e caspase-1 contribuiu para a reabsorção óssea nas condições deste estudo. (AU)

• FAPESP's process: 14/04926-8 - NLRC4 and NLRP3 inflammasomes in experimental periodontal disease induced by Aggregatibacter actinomycetemcomitans
• Grantee: Fernanda Regina Godoy Rocha
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