Estudo das funções da região ácida e domínio NAP da proteína SET em linhagem celular

Resumo

Em tecido normal de cavidade oral não foi observada a marcação com anticorpoanti-SET por imunohistoquímica enquanto tecidos com hiperplasia e carcinomaapresentaram alto nível da proteína. Sendo assim a proteína SET pode ser um potencialmarcador tumoral e com um aparente papel nesta tumorigênese. Existem evidências de queregiões específicas da proteína SET atuam em funções específicas na célula, tais comocontrole de expressão gênica, controle de ciclo celular, sinalização de apoptose, migraçãocelular e diferenciação celular. O objetivo deste trabalho de IC é caracterizar a função deduas regiões específicas da SET em linhagem celular humana. As regiões foramselecionadas com base em resultados prévios e correspondem a região N-terminal (1-220aa) e a região C-terminal (220-278 aa). Os plasmídeos de expressão em eucarioto(pcDNA3.1/V5) contendo os cDNAs correspondentes já foram obtidos e a linhagem celularHEK293T e HaCat humanas já estão disponíveis para o estudo. A análise da expressãoectópica destas regiões da SET serão realizadas por immunoblotting usando anticorpo anti-V5. Os ensaios para identificar efeito específico das regiões serão análise de apoptose comcompostos diferentes, migração celular após estímulo com indutores de migração,distribuição celular e co-localização com proteínas ligantes. Esta proposta permitirá otreinamento do aluno de IC e os resultados obtidos serão extremamente importante, poisfazem parte de uma proposta mais ampla para o estudo funcional e molecular da proteína.