Envolvimento do complexo 1 da mTOR no controle da função de macrófagos durante resposta inflamatória crônica associada a obesidade e resistência a insulina

Resumo

A inflamação crônica de baixa intensidade e a ativação da via de sinalização intracelular sensível a nutrientes da mTOR são importantes componentes do desenvolvimento da resistência a insulina associada a obesidade. Entretanto, as inter-relações entre mTOR e a inflamação crônica associada a obesidade ainda não foram investigadas. Desta forma, o presente projeto tem como objetivo geral investigar o envolvimento do complexo 1 da mTOR no controle da função de macrófagos envolvidos na gênese e manutenção da inflamação crônica de baixa intensidade associada a obesidade. Para isto, experimentos in vivo de perda de função do complexo 1 da mTOR (inibição farmacológica com rapamicina) serão realizados em camundongos induzidos obesos por dieta rica em gordura, onde serão avaliados: 1) tolerância a glicose e a insulina; 2) sinalização intracelular da insulina e de receptores toll-like em macrófagos e adipócitos; 3) concentração plasmática de citocinas e metabólitos; 4) composição celular do tecido adiposo; 5) recrutamento e ativação de macrófagos no tecido adiposo; 6) transição de macrófagos do estado M2 para o estado M1 pró-inflamatório; 7) a secreção basal e estimulada de citocinas por macrófagos; 8) perfil lipídico, síntese de triacilglicerol e atividade de enzimas lipogênicas em macrófagos; 9) expressão gênica em macrófagos e adipócitos de fatores de transcrição e correguladores relacionados com a produção de citocinas e síntese de lipídios. Os itens 2, 7, 8 e 9 serão investigados também in vitro em células RAW 264.7 (linhagem permanente de macrófagos) e macrófagos primários peritoneais e derivados da medula óssea após ativação/inibição genética e farmacológica do complexo 1 da mTOR.