Resumo
A procura de novos produtos naturais está se tornando, cada vez mais, uma importante fonte de inspiração para a maioria dos ingredientes ativos de fármacos no mundo todo, existindo uma necessidade crescente da utilização de plataformas analíticas cada vez mais sofisticadas para identificação quantitativa e qualitativa de compostos naturais de uma forma rápida e eficiente. Entre essas tecnologias, encontra-se a combinação de cromatografia líquida de alta resolução e espectrometria de massas de múltiplas etapas (LC-MS e MSn). Sabe-se, até agora, que os venenos de insetos são misturas complexas de compostos biologicamente ativos, porém poucas espécies Brasileiras foram caracterizadas quimicamente até o presente momento. Dessa forma, o principal objetivo deste projeto é a padronização da técnica de análise de "footprinting" metabolômico com o uso de um sistema LC (DAD) /IT-TOF/MS, MSn e GC-EI/MS de alta resolução, construindo-se inicialmente um banco de compostos de baixas massas moleculares, característicos de venenos de artrópodes. Os venenos de diferentes espécies de Artrópodes venenosos serão analisados nas mesmas condições analíticas em que o banco de compostos será padronizado, e os resultados comparados com os dados do banco para identificação dos compostos de baixas massas moleculares destes venenos. Este projeto também abordará o desenvolvimento de protocolos experimentais para estudos de "varredura analítica" da biblioteca natural de peptídeos, que constituem os venenos dos Artrópodes peçonhentos, baseado no uso de técnicas de LC-IT-TOF/MS e MSn em micro-escala. Os peptídeos seqüenciados por esta estratégia serão sintetizados e submetidos a estudos de caracterização de estrutura secundária por técnicas espectroscópicas (CD e RMN), e também a ensaios de atividades biológica, tais como dor, inflamação, antibiose, neurotoxicidade / antiepilepsia. A interação com sistema membrano-miméticos (membranas planares e vesículas de diferentes tipos) será abordada com o uso de técnicas biofísicas. Dessa maneira, esse projeto procura cumprir alguns dos objetivos principais do projeto BIOprospecTA da FAPESP para bioprospecção da biodiversidade do Estado de São Paulo. (AU)
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