Reconhecimento molecular em septinas: estudos da interface entre SEPT7 e SEPT12

Resumo

As septinas pertencem a uma grande família de proteínas, caracterizadas por um domínio conservado de ligação a nucleotídeos de guanina. Primeiramente identificadas em leveduras, há cerca de 40 anos, nas quais desempenham um importante papel na septação e divisão celular, estas proteínas estão associadas a diversos processos celulares e patologias em eucariotos. Devido a importância dessa classe de proteínas, é imprescindível compreender as bases molecular e fisiológica de suas funções e o papel da ligação e hidrólise do GTP. Atualmente, um dos maiores desafios no estudo das septinas é entender sua habilidade de interagir especificamente com outras subunidades de septinas para formar heterofilamentos, os quais podem originar estruturas de mais alta ordem. Este aspecto é fundamental para a nossa compreensão da sua bioquímica, bem como melhor elucidar o seu possível papel em diferentes patologias. Esta proposta tem como objetivo estudos estruturais e biofísicos da interação entre os domínios G (domínio de ligação ao GTP) que compõe o heterodímero SEPT7-SEPT12, ainda não estudado em termos estruturais. Como ponto de partida, o alvo principal para os ensaios de cristalização e resolução estrutural será o heterodímero, cuja existência in vivo já foi reportada na literatura. Adicionalmente, baseando-se nas mutações encontradas na proteína SEPT12 (SEPT12T89M e SEPT12D197N) em homens inférteis, serão realizadas análises comparativas da proteína nativa e mutantes, a fim de avaliar o papel das mutações na interação que compõe o heterodímero. Os resultados deste trabalho contribuirão efetivamente para o avanço no entendimento da formação de filamentos identificados no annulus do espermatozoide e como estes estão associados com os fenótipos apresentados por homens inférteis. (AU)