Estudos estruturais de complexos de septinas humanas

Resumo

As septinas pertencem a uma grande família de proteínas que conservam um domínio de ligação a nucleotídeos de guanina e tem sido associadas a importantes processos celulares e certas patologias em eucariotos. Embora relevantes, há ainda muitas informações sobre tais moléculas não esclarecidas, como a base molecular de suas funções e o papel da hidrólise de GTP. Assim, estudos de caracterização estrutural e funcional desta família de proteínas são essenciais para entender tais aspectos fundamentais, bem como para associar a função dessas proteínas nas diversas patologias as quais elas tem sido relacionadas. Um aspecto interessante das septinas, cujo mecanismo também é ainda pouco entendido, é que elas são capazes de se polimerizar para formar hetero-oligômeros, os quais se arranjam em filamentos altamente organizados. Assim, esta proposta objetiva análises de complexos de septinas ainda não estudados em termos estruturais. Como ponto de partida, o alvo principal para os ensaios de cristalização e resolução estrutural será o complexo formado pelas septinas 3, 5 e 7, cuja existência in vivo já foi relatada, afim de esclarecer como as septinas do grupo I se localizam e interagem na montagem do heterofilamento. Adicionalmente, baseando-nos em resultados prévios de ensaios de interação das septinas via duplo-híbrido, mais dois complexos também serão alvo de estudos estruturais: os complexos SEPT5-SEPT6-SEPT7 e SEPT5-SEPT8-SEPT7, exibindo uma única ou duas substituições, respectivamente, segundo as regras de Kinoshita. O propósito destes últimos está em validar as regras estabelecidas por Kinoshita no que diz respeito a substituição de septinas dentro do complexo SEPT2-SEPT6-SEPT7. Os resultados deste trabalho contribuirão para o avanço no entendimento dos heterocomplexos de septinas e de como essas proteínas interagem entre si nesse arranjo.