Estudos cineticos e funcionais das proteinas humanas da familia septina

Resumo

O projeto de pesquisa aqui apresentado tem como objetivo o emprego da técnica de ressonância plasmônica de superfície (SPR) para a determinação das afinidades das interações entre diferentes septinas, seus domínios isolados e ainda entre septinas e outras proteínas que interagem com septinas, como a Borg e a alfa-synucleina, que já estão disponíveis para análise no CBME. As septinas estão envolvidas em uma série de funções celulares como citocinese, exocitose e o tráfego vesicular, e estudos recentes mostram seu envolvimento em diversos processos patológicos como câncer no ovário, próstata, melanoma, mama, tumores cerebrais, doenças neurodegenerativas e, mais recentemente, em processos inflamatórios. As septinas são associadas à membrana celular sob forma de suporte e barreiras para demarcar compartimentos locais como a estabilização do sítio de divisão citoplasmático celular seguindo a divisão do núcleo da célula, e para isso formam complexos hetero-oligoméricos agrupando-se na forma de filamentos. O CBME do IFSC atualmente trabalha com mais de 30 construções diferentes de septinas, desde domínios isolados até septinas inteiras, e a caracterização cinética das interações entre essas espécies, inédita na literatura, possibilitará uma melhor compreensão de seus padrões de interação e permitirá o direcionamento dos esforços de cristalização para os complexos de maior afinidade. Na literatura, a tecnologia de SPR tem sido utilizada para caracterizar uma enorme variedade de interações do tipo proteína-proteína, e as análises em tempo real, dispensando marcadores e utilizando baixa quantidade de amostras tornam a técnica de SPR ideal para a análise de interações entre septinas. O pesquisador tem comprovada experiência com SPR, tendo realizado parte de seu doutorado na ROCHE, Califórnia, onde trabalhou diretamente com essa técnica, além de já a ter utilizado para a determinação das taxas cinéticas e afinidades de diversas proteínas no CBME/IFSC. (AU)