Busca avançada
Ano de início
Entree

(bioen/pronex FAPESP) Development of beta-glycosidases designed to improve the efficiency of noncomplexed cellulase systems

Processo: 08/55914-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Programa BIOEN - Temático
Vigência: 01 de junho de 2009 - 31 de maio de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Convênio/Acordo: CNPq - Pronex
Pesquisador responsável:Sandro Roberto Marana
Beneficiário:Sandro Roberto Marana
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):11/18266-1 - Estudo experimental da relevância dos resíduos centrais da rede estrutural de uma beta-glicosidase nas suas propriedades catalíticas e estruturais, BP.DD
11/50103-5 - Estudo de redes de contato envolvidas na modulação da especificidade pelo substrato em uma beta-glicosidase empregando a técnica de SDSL, BP.PD
10/52041-4 - Estudo funcional de posições da estrutura primária com frequência de aminoácidos acoplada em beta-glicosidases, BP.PD
+ mais bolsas vinculadas 10/50871-0 - Produção e caracterização dos meio-barris (b/a)r e de um barril truncado (b/a)6 a partir do barril (B/A) 8 da beta-glicosidase de Spodoptera frugiperda, BP.PD
09/53696-7 - Construção de uma proteína quimérica combinando domínios de beta-glicosidase e de ligação de celulose, BP.PD
09/13848-2 - Desenvolvimento através de evolução dirigida de beta-glicosidases com alta atividade e especificidade por celobiose, BP.PD
09/52021-6 - Produção e purificação el larga escala de uma beta-glicosidase recombinante para determinação de estrutura cristalográfica, BP.IC - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):beta-Glicosidases  Hidrólise enzimática  Celulose 
Publicação FAPESP:http://media.fapesp.br/bv/uploads/publicacoes/pasta_bioen_jun2012_128.pdf

Resumo

A velocidade de hidrólise enzimática de celulose diminui ao longo da reação, o que representa uma perda de produtividade para este processo. Um dos fatores que causam este problema é a inibição das endoglucanas e celobiohidrolases pela cebiose produzida no processo de hidrólise. A fim de superar esta dificuldade, este projeto propõe a construção de uma enzima quimérica através da fusão de um beta-glicosidase e um ‘domínio ligante celulose’ (CBM). Através do CBM esta enzima seria direcionada para a superfície da fibra de celulose e por meio de sua atividade de beta-glicosidase ela reduziria a concentração de celobiose diretamente no microambiente de ação das endoglucanases e celobiohidrolases. Além disso celobiose produzida por estas enzimas seria ‘canalizada’ diretamente para beta-glicosidase, o que poderia ampliar o sinergismo entre estas enzimas que formam o sistema celulásico. Este projeto também pretende selecionar beta-glicosidases altamente ativas e especificas por celobiose usando ‘evolução dirigida’. Finalmente, redes de aminoácidos que estão envolvidas na determinação da especificidade pelo substrato em beta-glicosidases serão delimitadas e caracterizadas através de ‘mutagênese randômica’, ‘mutagênese sítio-dirigida’ e determinação de estruturas cristalográficas. (AU)

Publicações científicas (7)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
TAMAKI, FABIO K.; SOUZA, DIORGE P.; SOUZA, VALQUIRIA P.; IKEGAMI, CECILIA M.; FARAH, CHUCK S.; MARANA, SANDRO R. Using the Amino Acid Network to Modulate the Hydrolytic Activity of beta-Glycosidases. PLoS One, v. 11, n. 12 DEC 9 2016. Citações Web of Science: 1.
SAYEGH, RAPHAEL S. R.; TAMAKI, FABIO K.; MARANA, SANDRO R.; SALINAS, ROBERTO K.; ARANTES, GUILHERME M. Conformational flexibility of the complete catalytic domain of Cdc25B phosphatases. PROTEINS-STRUCTURE FUNCTION AND BIOINFORMATICS, v. 84, n. 11, p. 1567-1575, NOV 2016. Citações Web of Science: 1.
SOUZA, VALQUIRIA P.; IKEGAMI, CECILIA M.; ARANTES, GUILHERME M.; MARANA, SANDRO R. Protein thermal denaturation is modulated by central residues in the protein structure network. FEBS Journal, v. 283, n. 6, p. 1124-1138, MAR 2016. Citações Web of Science: 9.
BETON, DANIELA; MARANA, SANDRO R. Half-Barrels Derived from a (beta/alpha)(8) Barrel beta-Glycosidase Undergo an Activation Process. PLoS One, v. 10, n. 10 OCT 2 2015. Citações Web of Science: 2.
GONCALVES, LARISSA M.; CHAIMOVICH, HERNAN; CUCCOVIA, IOLANDA M.; MARANA, SANDRO R. Chimeric Proteins Combining Phosphatase and Cellulose-Binding Activities: Proof-of-Concept and Application in the Hydrolysis of Paraoxon. PROTEIN AND PEPTIDE LETTERS, v. 21, n. 5, p. 468-475, MAY 2014. Citações Web of Science: 1.
FRUTUOSO, M. A.; MARANA, S. R. A Single Amino Acid Residue Determines the Ratio of Hydrolysis to Transglycosylation Catalyzed by beta-Glucosidases. PROTEIN AND PEPTIDE LETTERS, v. 20, n. 1, p. 102-106, JAN 2013. Citações Web of Science: 14.
MENDONCA, LUCIO M. F.; MARANA, SANDRO R. Single mutations outside the active site affect the substrate specificity in a beta-glycosidase. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS, v. 1814, n. 12, p. 1616-1623, DEC 2011. Citações Web of Science: 15.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.