Estudos estruturais e funcionais objetivando compreender o papel de toxinas de venenos de serpentes e de como inibir a sua atividade biológica

• Processo: 15/17286-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2016
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2019
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Beneficiário: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Angelo José Magro ; Maeli Dal Pai ; Marcia Gallacci ; Ney Lemke ; Paulo Correia-de-Sá
• Assunto(s): Venenos de serpentes Fosfolipases A2
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Evenenamento por acidentes ofídicos | Fosfolipases A2 | inibidores de toxinas | tecnicas biofisicas | técnicas funcionais in vivo | Veneno de serpentes | Toxinologia estrutural

Resumo

Envenenamento causado por serpentes é considerado um grave problema de saúde pública em muitos países tropicais e subtropicais e foi recentemente incluído na lista de Doenças Tropicais Negligenciadas pela Organização Mundial de Saúde. Na América Latina, a maioria dos acidentes ofídecos são causados por serpentes dos gêneros Bothrops e Crotalus. Uma das principais complicações em relação aos envenenamento botrópicos é o dano muscular local proeminente e subsequente bloqueio de transmissão neuromuscular, que é normalmente induzido pela fosfolipase A2, que é um importante componente destes venenos. Neste projeto, nós propomos, pela primeira vez, um estudo estrutural e funcional amplo de proteínas de veneno de serpentes - nativas, recombinantes e complexadas com potenciais inibidores. Serão utilizadas as seguintes técnicas: i) estrutural/biofísico: cristalografia, espalhamento de raios-X a baixos ângulos, dicroísmo circular, espalhamento de luz dinâmico, fluorescência e calorimetria por titulação isotérmica, bioinformática estrutural; ii) estudos in vitro funcionais, incluindo eletrofisiologia, técnicas miográficas, vídeo-microscopia em tempo real e estudos de radioquímicos; iii) análise morfológica (óptica, confocal e microscopia eletrônica). Estas informações podem ser muito importantes para a identificação, caracterização e desenvolvimento (drug design) de substâncias com utilidade biotecnológicas e farmacológicas. Estes compostos podem ser utilizados para o controle de sintomas que não podem ser prevenidos ou revertidos por administração terapêutica de soro anti-ofídico e como auxílio para o tratamento do processo patológico subjacente. Este projeto está alinhado com outros projectos anteriormente apoiados pela FAPESP (quatro na área de proteínas de veneno de serpentes) e CNPq (três projetos) desde 1997. Além disso, o laboratório brasileiro também foi apoiado pelo INCT em Toxinologia (FAPESP / CNPq) e projeto Toxinologia da CAPES. A produção científica do laboratório brasileiro na área de toxinas conta com cerca de 60 artigos e 16 dissertações/teses concluídas. Desde 1991, o Laboratório de Farmacologia e Neurobiologia fazer, ICBAS-UPorto tem feito pesquisas pioneiras no estudo da patogenia dos déficits da transmissão neuromuscular, rotineiramente usando neuroquímicos, abordagens eletrofisiológicas e bioimagem necessárias para este projeto. Ambos grupos de pesquisa brasileirose portugues têm um projeto de colaboração que inclui um artigo publicado recentemente e uma bolsa de pós-doutorado da FAPESP (BEPE-FAPESP n ° 2013 / 03624-5). (AU)

Publicações científicas

(13)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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BOLDRINI-FRANCA, JOHARA; PINHEIRO-JUNIOR, ERNESTO LOPES; PEIGNEUR, STEVE; PUCCA, MANUELA BERTO; CERNI, FELIPE AUGUSTO; BORGES, RAFAEL JUNQUEIRA; COSTA, TASSIA RAFAELLA; IMAI CARONE, SANTE EMMANUEL; DE MATTOS FONTES, MARCOS ROBERTO; SAMPAIO, SUELY VILELA; et al. Beyond hemostasis: a snake venom serine protease with potassium channel blocking and potential antitumor activities. SCIENTIFIC REPORTS, v. 10, n. 1, MAR 11 2020. (15/18432-0, 15/00740-0, 18/14158-9, 16/24191-8, 15/16714-8, 17/13485-3, 11/23236-4, 17/14035-1, 16/04761-4, 14/16182-3, 15/17286-0)

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CARDOSO, FABIO F.; BORGES, RAFAEL J.; DREYER, THIAGO R.; SALVADOR, GUILHERME H. M.; CAVALCANTE, WALTER L. G.; DAL PAI, MAELI; GALLACCI, MARCIA; FONTES, MARCOS R. M.. Structural basis of phospholipase A(2)-like myotoxin inhibition by chicoric acid, a novel potent inhibitor of ophidian toxins. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1862, n. 12, p. 2728-2737, DEC 2018. (15/17286-0, 12/07112-6)

FERNANDES, CARLOS A. H.; MOREA, EDNA GICELA O.; DOS SANTOS, GABRIEL A.; DA SILVA, VITOR L.; VIEIRA, MARINA ROVERI; VIVIESCAS, MARIA ALEJANDRA; CHATAIN, JEAN; VADEL, AURELIE; SAINTOME, CAROLE; FONTES, MARCOS ROBERTO M.; et al. A multi-approach analysis highlights the relevance of RPA-1 as a telomere end-binding protein (TEBP) in Leishmania amazonensis. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS, v. 1864, n. 7, JUL 2020. (15/17286-0, 18/04375-2, 19/11496-3)

FERNANDES, CARLOS A. H.; PAZIN, WALLANCE M.; DREYER, THIAGO R.; BICEV, RENATA N.; CAVALCANTE, WALTER L. G.; FORTES-DIAS, CONSUELO L.; ITO, AMANDO S.; OLIVEIRA, CRISTIANO L. P.; FERNANDEZ, ROBERTO MORATO; FONTES, MARCOS R. M.. Biophysical studies suggest a new structural arrangement of crotoxin and provide insights into its toxic mechanism. SCIENTIFIC REPORTS, v. 7, MAR 3 2017. (15/17286-0, 13/17864-8)

BORGES, RAFAEL J.; SALVADOR, GUILHERME H. M.; PIMENTA, DANIEL C.; DOS SANTOS, LUCILENE D.; FONTES, MARCOS R. M.; USON, ISABEL. SEQUENCE SLIDER: integration of structural and genetic data to characterize isoforms from natural sources. Nucleic Acids Research, v. 50, n. 9, p. 16-pg., 2022-05-20. (16/24191-8, 15/17286-0, 19/05958-4, 20/10143-7)