Participação do eixo RAGE/AGE sobre o acúmulo de lípides em macrófagos induzido por albumina humana modificada por glicação avançada

• Processo: 14/05951-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 24 de julho de 2014
• Data de Término da vigência: 14 de setembro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Marisa Passarelli
• Beneficiário: Adriana Machado Saldiba de Lima
• Supervisor: Ann Marie Schmidt
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: NYU Langone Medical Center, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 12/19112-0 - Participação do eixo rage/age sobre o acúmulo de lípides em macrófagos induzido por albumina modificada por glicação avançada - contribuição do controle glicêmico no diabete melito, BP.PD
• Assunto(s): Aterosclerose Diabetes mellitus
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: aterosclerose | diabetes | Produtos de glicação avançada (AGE) | Receptor para os produtos de glicação avançada (RAGE) | Complicações cardiovasculares

Resumo

Produtos de glicação avançada (AGE) encontram-se aumentados no diabete melito (DM) e predizem o risco de doença aterosclerótica, independentemente de outros fatores de risco. Albumina-AGE induz geração de espécies reativas de oxigênio (ROS), o que está vinculado à diminuição de ABCA-1 e o acúmulo de colesterol em macrófagos. Nossa hipótese é de que os efeitos da albumina AGE em prejudicar o transporte reverso de colesterol (TRC) podem ser prevenidos pelo silenciamento ou knocking out do receptor para AGE (RAGE). Albumina controle (C) de indivíduos saudáveis e albumina AGE de pacientes diabéticos tipo 1 (DM1) e tipo 2 (DM2) com controle glicêmico inadequado (HbA1c > 8%) foram isoladas por HPLC seguida de purificação por extração alcoólica. Macrófagos isolados da medula óssea de camundongos knockout para RAGE (RAGE-KO) e selvagens (wild-type - WT) e células THP-1 transfectadas com siRNA-RAGE tratados por 48h com albumina C, DM1 e DM2 para medir a expressão da NOX-4 (NADPHoxidase4) e do RAGE (Ager), e também do efluxo de colesterol mediado por apo A-I e subfrações de HDL. Nas células THP-1 tratadas com o siRNA-RAGE foi observado um silenciamente de 71% na expressão do RAGE. Nessas células, a expressão do RAGE e da NOX-4 foi reduzida após o tratamento com albumina DM1 ou DM2 e não houve alteração após o tratamento com albumina C quando comparado com as células transfectadas com scramble siRNA. Em macrófagos isolados da medula óssea de animais WT, o efluxo de colesterol mediado por apo A-I e subfrações de HDL foi reduzido após o tratamento com albumina DM1 ou DM2 quando comparado com albumina C. Essa redução não foi observada quando macrófagos isolados de animais RAGE-KO foram tratados com albumina DM1 ou DM2 em comparação ao tratamento com albumina C. A indução do estresse oxidativo e o prejuízo no efluxo de colesterol em macrófagos suscitados após o tratamento de albumina AGE isolada de pacientes diabéticos pode ser prevenida pela inibição do RAGE. O uso de bloqueadores de AGE podem ser úteis na prevenção de distúrbios do TRC e da aterosclerose na vigência do diabetes mal controlado. Com intuito de continuar essa investigação, nós planejamos transfectar células THP-1 com RNA de inferência para RAGE ou tratar células J774 com anti-RAGE para concluir os experimentos de expressão gênica. Além disso, macrófagos da medula óssea isolados de animais RAGE-KO e WT serão utilizados para analisar o acúmulo intracelular de lípides com Oil Red O. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MACHADO-LIMA, ADRIANA; LOPEZ-DIEZ, RAQUEL; IBORRA, RODRIGO TALLADA; PINTO, RAPHAEL DE SOUZA; DAFFU, GURDIP; SHEN, XIAOPING; NAKANDAKARE, EDNA REGINA; MACHADO, UBIRATAN FABRES; CORREA-GIANNELLA, MARIA LUCIA CARDILLO; SCHMIDT, ANN MARIE; et al. RAGE Mediates Cholesterol Efflux Impairment in Macrophages Caused by Human Advanced Glycated Albumin. INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, v. 21, n. 19, OCT 2020. (12/19112-0, 15/21072-5, 13/06800-9, 18/00172-0, 13/26256-1, 12/12088-7, 14/05951-6, 16/15603-0)