Mecanismos de regulação da expressão da proteína quinase C atípica PKMZ, e identificação do seu interactoma em contextos neurais específicos.

• Processo: 15/17812-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2015
• Data de Término da vigência: 28 de março de 2020
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Deborah Schechtman
• Beneficiário: Dimitrius Tansini Pramio
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Transdução de sinais Epigênese genética Interação proteína-proteína Epigenômica Neoplasias mamárias
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: epigenética | Interação proteína-proteína | Neuro | sinalização celular | interações proteína-proteína

Resumo

O câncer de mama é uma doença frequente entre as mulheres, de comportamento clínico heterogêneo, e composto por uma vasta gama de perfis moleculares. Inserida neste contexto, a família da proteína quinase C, um conjunto de dez serina/treonina quinases, é de importância central, e está relacionada com inúmeras funções celulares. No entanto, o papel exato de cada isoenzima ainda não está bem definido nos diferentes subtipos desta doença. A identificação da atividade diferencial, localização subcelular e caracterização dos substratos das PKCs nos diferentes subtipos de câncer de mama são, portanto essenciais para o entendimento da biologia destes tipos de tumores. Recentemente nosso grupo desenvolveu anticorpos poli e monoclonais que reconhecem especificamente as PKCs clássicas (cPKCs) ativas, e com essa ferramenta inovadora em mãos nos propomos a estudar a atividade das cPKCs ativas em uma linhagem de câncer de mama com perfil molecular luminal estrogênio positiva (ER+), MCF-7, e em amostras de pacientes com esse tipo de tumor. Dados anteriores do nosso laboratório demonstraram que as PKCsbI e bII são primordialmente expressas no núcleo das células MCF-7. Para detectar quais os possíveis substratos nucleares destas isoenzimas, realizaremos ensaios de imunoprecipitação e Bimolecular fluorescence complementation (BiFC). Ainda, observaremos neste modelo a fosforilação de resíduos específicos de histonas que atuam como importantes marcas epigenéticas, por meio de ensaios in vitro e de imunoprecipitação da cromatina, validando estes dados em pacientes com tumores de mama ER+. Desta forma, identificaremos proteínas que interagem com as cPKCs e podem se tornar futuros biomarcadores ou alvos terapêuticos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE OLIVEIRA, PAULO SERGIO L.; FERRAZ, FELIPE AUGUSTO N.; PENA, DARLENE A.; PRAMIO, DIMITRIUS T.; MORAIS, FELIPE A.; SCHECHTMAN, DEBORAH. Revisiting protein kinase-substrate interactions: Toward therapeutic development. Science Signaling, v. 9, n. 420, MAR 22 2016. (12/24154-4, 15/17812-3, 11/10321-3, 15/21786-8)

DE OLIVEIRA, PAULO SERGIO L.; FERRAZ, FELIPE AUGUSTO N.; PENA, DARLENE A.; PRAMIO, DIMITRIUS T.; MORAIS, FELIPE A.; SCHECHTMAN, DEBORAH. Revisiting protein kinase-substrate interactions: Toward therapeutic development. SCIENCE SIGNALING, v. 9, n. 420, p. 12-pg., 2016-03-22. (15/21786-8, 15/17812-3, 11/10321-3, 12/24154-4)

PRAMIO, DIMITRIUS TANSINI; VIECELI, FELIPE MONTELEONE; VARELLA-BRANCO, ELISA; GOES, CAROLINA PURCELL; KOBAYASHI, GERSON SHIGERU; PELEGRINA, DIOGO VIEIRA DA SILVA; MORAES, BEATRIZ CAROLINE DE; EL ALLAM, AICHA; DE KUMAR, BONY; JARA, GABRIEL; et al. DNA methylation of the promoter region at the CREB1 binding site is a mechanism for the epigenetic regulation of brain-specific PKM zeta. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENE REGULATORY MECHANISMS, v. 1866, n. 1, p. 13-pg., 2023-01-25. (19/06982-6, 15/24046-5, 20/13929-1, 20/16204-8, 15/17812-3)