Anticorpos conformacionais específicos para a PKC beta I e suas aplicações

Resumo

Nos últimos anos nosso laboratório vem caracterizando o papel das proteínas quinases C (PKC) em células tronco embrionárias (CTE) indiferenciadas. Nossos dados sugerem que a maioria dos substratos da PKC²I em CTE indiferenciadas são proteínas nucleares que regulam a transcrição de proteínas envolvidas em processos de proliferação/ diferenciação. Estudos recentes também constataram a presença da PKC²I no núcleo de células de tumor de mama e de próstata. Estes estudos determinaram que a PKC²I regula a fosforilação da Histona H3 nestas células e consequentemente a metilação da mesma que por sua vez controla a expressão de genes envolvidos na proliferação das células tumorais. Juntos, estes dados contribuem para a hipótese de que a PKC²I possa estar envolvida em processos de proliferação e auto-renovação tanto de CTE como de tumores de próstata e mama. Dessa forma, a serina/ treonina quinase, PKC²I pode ser importante para a auto-renovação das CTE bem como um alvo chave para estratégias terapêuticas e de prognóstico de câncer de mama e de próstata. Ainda não se conhecem os mecanismos que levam à translocaçao nuclear da PKC²I bem como proteínas que interagem com esta quinase. Além disso, até o presente poucos alvos da PKC²I foram caracterizados. Dessa forma, acreditamos que a elucidação da função da PKC²I em CTE, ou em células de câncer de mama e próstata permitirá o melhor entendimento do processo de auto-renovaçao nesses tipos celulares. Além disso, tais estudos possibilitará o desenho racional de novos fármacos que tem como alvo a PKC²I. Para tanto, necessitamos desenvolver novas ferramentas para se estudar a estrutura da PKC²I bem como caracterizar as proteínas parceiras dessa quinase. Nesse sentido, no presente projeto visamos desenvolver anticorpos conformacionais que possam ser utilizados para a caracterização estrutural e funcional das PKCs em CTE indiferenciadas, câncer de mama e de próstata. (AU)