O papel funcional da proteína adaptadora RACK1 na sinalização de Ca2+ em mastócitos

• Processo: 16/21988-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 12 de junho de 2017
• Data de Término da vigência: 15 de novembro de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
• Pesquisador responsável: Maria Célia Jamur
• Beneficiário: Edismauro Garcia Freitas Filho
• Supervisor: Indu S. Ambudkar
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: National Institutes of Health, Bethesda (NIH), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 15/16673-0 - O papel funcional da proteína adaptadora RACK1 na ativação de mastócitos, BP.DR
• Assunto(s): RACK1 Biologia celular e molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Activation | Calcium channels | Mast Cells | Rack1 | signalling pathway | Biologia Celular e Molecular

Resumo

Os mastócitos são células efetoras do sistema imunológico que participam em diversos processos como: asma, alergia e inflamação. A função dos mastócitos está diretamente relacionada à sua ativação que resulta na liberação de diversos mediadores químicos. A via de ativação mais caracterizada em mastócitos é através do receptor de alta afinidade para a IgE (FceRI). A liberação dos mediadores pelos mastócitos depende do aumento da concentração intracelular de Ca2+ e do influxo de Ca2+ extracelular. Embora estudos prévios demonstrem o mecanismo básico envolvido na ativação dos mastócitos, a função de algumas proteínas regulatórias relacionadas com a sinalização de cálcio em mastócitos ainda permanece desconhecida. A RACK1 (receptor for activated C kinase 1) é uma proteína adaptadora requerida por diversas proteínas envolvidas na sinalização de cálcio, que também participam da ativação dos mastócitos. Estudos anteriores demonstraram que RACK1 participa na ativação dependente de Ca2+ de algumas células imunes, portanto, poderia desempenhar um papel importante na asma. Recentemente o nosso laboratório identificou, pela primeira vez, a RACK1 em mastócitos. Os resultados preliminares demonstram que, após a ativação dos mastócitos RBL-2H3 via FceRI, a maioria da RACK1 é translocada do citoplasma para o núcleo. Entretanto, parte da RACK1 permanece em regiões adjacentes a membrana plasmática. A depleção de RACK1 mediada por ShRNA em mastócitos RBL-2H3 resulta em um aumento significativo na liberação do mediador pré-formado b-hexosaminidase, após a ativação via FceRI ou via entrada de Ca2+ estimulada por ionóforo de cálcio. Estes achados sugerem que RACK1 é um regulador da desgranulação em mastócitos e que a sua ação pode ser via cálcio. O presente estudo tem como objetivo caracterizar o papel funcional da RACK1 na sinalização de cálcio em mastócitos. A interação de RACK1 com as proteínas envolvidas na regulação da liberação de Ca2+ será investigada em mastócitos. Mastócitos RBL-2H3 ShRNA serão utilizados no estudo do papel da RACK1 na sinalização de cálcio. O papel de RACK1 na mobilização de Ca2+ será analisado durante a liberação de Ca2+ mediada por IP3 dos reservatórios do reticulo endoplasmático e na ativação do processo store-operated Ca2+ entry (SOCE), após a ativação via FceRI. O efeito da expressão de RACK1 no SOCE também será investigado de forma independente da liberação de Ca2+ dos reservatórios do RE mediada por PLCg, através do estímulo das células com thapsigargin. O conhecimento sobre o papel de RACK1 na sinalização de cálcio em mastócitos poderá levar a novos alvos terapêuticos envolvidos nos processos alérgicos e inflamatórios.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FREITAS FILHO, EDISMAURO G.; DA SILVA, ELAINE Z. M.; ONG, HWEI LING; SWAIM, WILLIAM D.; AMBUDKAR, INDU S.; OLIVER, CONSTANCE; JAMUR, MARIA CELIA. RACK1 plays a critical role in mast cell secretion and Ca2+ mobilization by modulating F-actin dynamics. Journal of Cell Science, v. 134, n. 9, MAY 2021. (17/14645-4, 09/54014-7, 17/18618-1, 16/13228-8, 16/21988-2, 15/16673-0, 09/54013-0)