Estudo do mecanismo molecular de sinalização da ativação da via WNT/BETA-CATENINA pela Ouabaína em hipocampo de ratos.

Resumo

A enzima Na+, K+-ATPase (Sódio Potássio Adenosina Trisfosfatase) é uma proteína de membrana altamente conservada em eucariotos que estabelece e mantém altas concentrações intracelulares de K+ e baixas de Na+, através da hidrólise de uma molécula de ATP. No entanto, além de seu papel regulatório na homeostasia iônica, estudos sugerem um papel na transdução de sinal e na ativação da transcrição gênica. Na presença da ouabaína (OUA), esteróide cardiotônico endógeno, a Na+,K+ - ATPase é capaz de promover a oscilação nos níveis de Ca2+ intracelular, e de ativar a via da Src quinase, com consequente transativação do receptor de fator de crescimento epidermal (EGFR), e da via da MAPK (proteína quinase ativada por mitógeno), que por sua vez pode ativar vários fatores de transcrição, tais como NFkappaB (fator de transcrição nuclear kappa B). O NFkappaB regula a expressão de genes que controlam a morte celular programada, a adesão celular, a proliferação, a inflamação e o remodelamento tecidual. Uma vez ativada, a via do NFkappaB parece ser capaz de modular a ativação de outras vias de sinalização, como a via canônica da Wnt (Wnt/Beta-CATENINA).Recentemente, dados da literatura têm mostrado que a ativação de receptores de EGF pode levar a transativação da Beta-CATENINA nuclear, modulando o efetor da via canônica da Wnt, sem necessariamente levar a ativação desta via através de seus receptores Frizzled. Dados prévios obtidos em nosso laboratório mostram que após 1 hora da infusão de OUA a via do NFkappaB está ativa, e que após 10 horas é possível verificar aumento da fosforilação da proteína GSK-3Beta, sendo que após 24 horas verifica-se aumento da translocação nuclear da Wnt-Beta-CATENINA. Dessa forma, o presente projeto tem como objetivo determinar o mecanismo molecular dessa modulação, visto que essas vias estão intimamente associadas ao aparecimento de doenças neurodegenerativas, câncer e processos inflamatórios.