Efeito do Amblyomin-X na interface do sistema imune e hemostático durante a progressão do tumor RENCA ( carcinoma renal murino): in vivo e in vitro

Resumo

As células cancerosas são provenientes de uma célula normal que sofreu alterações em sua expressão gênica, podem levar ao desenvolvimento do fenótipo maligno. O microambiente tumoral, composto por células cancerosas, matriz extracelular, fibroblastos, células do sistema imunológico e células endoteliais possui papel decisivo na gênese e progressão dos cânceres, tornando-se fundamental conhecer as vias de sinalização envolvidas para este processo patológico.Está descrito na literatura a importância de mediadores e efetores celulares da inflamação no microambiente tumoral, favorecendo ou inibindo o desenvolvimento do tumor. Nesse processo inflamatório, sabe-se que os macrófagos e as células B-1 presentes na cavidade peritoneal exercem grande atividade sobre a formação do tumor. Portanto, dependendo do contexto, as células inflamatórias podem ter papel benéfico e/ou prejudicial, estando envolvidas na patogênese de diversas doenças, incluindo as neoplasias. Além disso, a presença de um microambiente inflamatório, produção aberrante de proteínas e necrose associado à gênese tumoral, pode desencadear distúrbios no sistema hemostático, desencadeando alterações na coagulação e induzindo um fenótipo pró-trombótico.O tumor RENCA tem imunogenicidade baixa a moderada e pode ser injetado no sítio ortotópico, tornando-se altamente vascularizado durante seu crescimento, pode invadir localmente e formar metástases em linfonodos regionais, pulmões e fígado. Este tumor tem desenvolvimento progressivo, parecido ao descrito para o câncer renal humano, permitindo ser considerado um dos principais modelos para avaliação de abordagens química e imunoterapêuticas ao tratamento do câncer renal. Recentemente, foi obtida em nosso laboratório uma proteína recombinante originária da glândula salivar do carrapato Amblyomma cajennense, designada Amblyomin-X. Nossos dados evidenciaram que essa proteína induz apoptose em células tumorais distintas. Além disso, a proteína possui atividade anticoagulante pela inibição do FXa da coagulação sanguinea. Frente aos resultados evidenciados pela ação do Amblyomin-X sugere-se que a proteína possa de alguma maneira estar modulando a resposta imunológica no "clearance" do microambiente tumoral e auxiliando na redução da formação de metástases.Dessa maneira, são objetivos deste projeto: a) Caracterizar a ação do Amblyomin-X no perfil populacional de células peritoneais de animais portadores de metástases de Tumor RENCA e sua atividade secretória b) Averiguar a atividade secretória das células peritoneais aderentes co-cultivadas com as células tumorais de linhagem RENCA, c) Caracterizar sobrevida e padrão de metástases de tumor RENCA após nefrectomia e 10 dias de tratamento com Amblyomin-X d) avaliar o efeito do Amblyomin-X sobre diversos parâmetros da coagulação no modelo in vivo, e e) Determinar o padrão de resposta imune frente ao tumor e ao tratamento com Amblyomin-X, enfatizando o papel de células dendríticas , subpopulações de macrófagos e linfócitos T.