Caracterização de estirpes de Leptospira isoladas no Brasil através de tipificação por eletroforese em campo pulsado (PFGE) e análise comparativa de genomas.

Resumo

A caracterização de estirpes de Leptospira é essencial para o entendimento da epidemiologia da doença em humanos e animais. Tradicionalmente, utiliza-se a classificação sorológica para caracterizar os isolados em sorogrupos e sorovares. No entanto, apenas com a caracterização genômica das espécies de Leptospira será possível diferenciá-las e compreender os mecanismos moleculares da patogênese da leptospirose. O objetivo deste estudo é caracterizar, através da eletroforese em campo pulsado (PFGE) e da análise comparativa de genomas, 36 estirpes de Leptospira isoladas de distintas espécies animais, em diferentes regiões do Brasil, no período de 1967 a 2013. Estes isolados foram previamente tipificados pela técnica de aglutinação microscópica com anticorpos monoclonais. No entanto, não foi possível sua caracterização em nível de espécie e sorovar, de tal forma que são consideradas estirpes de Leptospira potencialmente autóctones. Através da PFGE será avaliada a clonalidade das estirpes e o perfil genotípico destas será comparado com o de sorovares conhecidos. Os isolados com distinto perfil genotípico serão submetidos ao sequenciamento de nova geração para obtenção dos respectivos genomas e análise comparativa destes com genomas de Leptospira previamente publicados no banco de dados GenBank. Também será avaliado o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos desses isolados a partir da técnica de microdiluição em caldo. Os resultados obtidos permitirão, além da completa caracterização desta coleção, diferenciar espécies e novos sorovares e contribuirão para o estudo da patogênese da leptospirose.