Edição gênica por CRISPR-Cas9 na correção da distrofia muscular de Duchenne no modelo canino (GRMD) a partir de células de pluripotência induzida

Resumo

Estratégias como a reprogramação induzida vêm sendo empregadas com o objetivo de induzir células somáticas a um estado pluripotente similar ao embrionário. O processo de reprogramação nuclear é extremamente desejável e possui importantes contribuições tanto no estudo da ciência básica como aplicada, por exemplo, no aumento da eficiência das biotécnicas de produção animal ou na medicina, com a possibilidade de terapia celular autóloga para o tratamento de inúmeras enfermidades. A distrofia muscular de Duchenne é uma doença genética que gera degeneração progressiva da musculatura esquelética. O gene que codifica a proteína distrofina é formado por 79 exons, e seu tamanho o torna muito susceptível a mutações. A Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne (DMD) que acomete seres humanos, e este modelo animal é o que mais se assemelha a mutação em humanos, com uma mutação pontual, onde o exon 7 é deletado, causando uma parada prematura no exon 8. Desta forma, o objetivo deste estudo é produzir IPS a partir de fibroblastos de cães afetados pela Distrofia Muscular de Duchenne, caracterizar tais células e submetê-las a técnica CRISPR-Cas9 de edição gênica para correção da mutação, gerando células saudáveis como modelo para futuros estudos em animais e humanos. A correção genética iPS-GRMD, expande um campo pouco explorado, permitindo a correção no modelo Golden Retriever e um escaneamento do gene e suas mutações. Embasando futuras pesquisas em humanos, possibilitando a correção de uma doença genética degenerativa, bem como o desenvolvimento de um modelo ainda inédito. (AU)