Investigação de novos mecanismos fisiopatológicos de hipercoagulabilidade na Doença Falciforme

Resumo

A doença falciforme (DF) é uma condição caracterizada por inflamação crônica e aumento importante do risco trombótico. Apesar de avanços na caracterização da hipercoagulabilidade nestes pacientes (consequências), pouco se avançou na identificação dos mediadores críticos para ativação e perpetuação da hipercoagulabilidade nestes pacientes (causas). No entanto, dois novos mediadores recentemente associados a complicações da DF, emergiram nos últimos anos como candidatos a elementos centrais da fisiopatologia das tromboses na DF. São eles: o heme livre, por seu papel como ativador da resposta imune inata via TLR4; e a geração de redes extracelulares de neutrófilos (NETs). Neste projeto, pretendemos utilizar modelos in vivo (pacientes) e in vitro para explorar o papel destes elementos na fisiopatologia da DF. O papel do heme livre será explorado em modelo em que sangue total de voluntários sadios é estimulado com heme, ou diferentes controles (inibidores e estimuladores relevantes), e a ativação da coagulação é medida por testes globais da hemostasia e pela expressão de fator tissular. A participação de NETs será avaliada em in vivo (pacientes) por FACS e Elisa, e in vitro, em um modelo induzido por heme. Um mediador crítico para a formação de NETs (PAD4), para o qual inibidores específicos foram disponibilizados, será avaliado ao nível de expressão gênica e proteica nos dois modelos. Por fim, a expressão de dois genes potencialmente relacionados ao heme e à inflamação na DF, identificados por nosso grupo, serão avaliados em uma coorte de pacientes com DF. O projeto faz parte de um esforço mais amplo, iniciado há alguns anos no Hemocentro da Unicamp, para avaliação dos mecanismos protrombóticos dependentes do heme na DF.