Monitoring the Targeting of Cathepsin D to the Lysosome by Metabolic Labeling and Pulse-chase Analysis

Autor(es)

Tavares, Lucas A. ^[1] ; daSilva, Luis L. P. ^[1]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Sao Paulo, Ribeirao Preto Med Sch FMRP, Dept Cell & Mol Biol, Ribeirao Preto, SP - Brazil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIO-PROTOCOL; v. 7, n. 21 NOV 5 2017.
• Citações Web of Science: 0

Resumo

Mannose 6-phosphate receptors function can be studied in living cells by investigating alterations in processing and secretion of their ligand Cathepsin D. The assay described here is well established in the literature and comprises the metabolic labeling of newly synthesized proteins with {[}S-35] methionine-cysteine in HeLa cells to monitor Cathepsin D processing through secretory pathway and secretion using immunoprecipitation, SDS-PAGE and fluorography. (AU)

• Processo FAPESP: 16/18207-9 - Caracterização de vias de tráfego de proteínas envolvidas na biogênese e funcionamento de lisossomos em células humanas
• Beneficiário: Lucas Alves Tavares
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Processo FAPESP: 14/25812-0 - Estudo sobre as interações moleculares de HIV-1 com o sistema de endomembranas da célula hospedeira
• Beneficiário: Luis Lamberti Pinto da Silva
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular