Osteoblastic cell behaviour in the presence of conditioned media from human mesenchymal umbilical cord cells

• Grant number: 11/00553-4
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Scientific Initiation
• Start date: April 01, 2011
• End date: March 31, 2012
• Field of knowledge: Biological Sciences - Morphology - Cytology and Cell Biology
• Principal Investigator: Karina Fittipaldi Bombonato Prado
• Grantee: Pauline Lourente
• Host Institution: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brazil

Abstract

O desenvolvimento e a remodelação óssea dependem de interações complexas entre osteoblastos e outras células presentes no microambiente ósseo. Fatores de crescimento e citocinas presentes no meio condicionado de células mesenquimais poderiam estimular o metabolismo de células osteoblásticas. Com esta hipótese, o objetivo deste projeto é avaliar o efeito do meio condicionado de células originárias do cordão umbilical no comportamento de células osteoblásticas. O meio condicionado será obtido a partir de culturas de células da camada subendotelial da veia do cordão umbilical com duração de 24, 48 e 72 horas. Este meio será coletado, filtrado e armazenado para posteriormente ser adicionado ao meio de cultura de células osteoblásticas provenientes da crista óssea alveolar humana. As culturas de células osteoblásticas serão divididas em quatro grupos experimentais: 1) controle (sem adição de meio condicionado); 2) adição de 50% de meio condicionado por 24 horas; 3) adição de 50% de meio condicionado por 48 horas e 4) adição de 50% de meio condicionado por 72 horas. Após 7, 10, 14 e 17 dias de cultura, serão analisados os seguintes parâmetros: proliferação e viabilidade celular, quantidade de proteína total, atividade de fosfatase alcalina, detecção e quantificação de nódulos mineralizados, quantificação de VEGF no sobrenadante das células osteoblásticas e expressão de genes relacionados à atividade osteoblástica através de PCR RealTime.