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Functional characterization and mechanisms responses from damage caused by L-aminoacid oxidase from Calloselasma rhodostoma in human cell lines

Grant number: 11/02645-3
Support Opportunities:Scholarships in Brazil - Doctorate
Start date: May 01, 2011
End date: August 31, 2014
Field of knowledge:Health Sciences - Pharmacy - Toxicological Analysis
Principal Investigator:Suely Vilela
Grantee:Tássia Rafaella Costa
Host Institution: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brazil

Abstract

As peçonhas de serpentes de uma forma geral são constituídas por uma grande variedade de proteínas com efeitos tóxicos que podem causar danos teciduais locais ou sistêmicos. A busca por compostos ativos, presentes nas peçonhas de serpentes, que são responsáveis pelo quadro do envenenamento ofídico tem sido alvo de muitas pesquisas. As L-aminoácido oxidases (LAAOs) constituem um dos principais componentes dos venenos de serpentes e tem sido estudadas devido à sua presença em grande quantidade, mas principalmente devido aos diversos efeitos fisiopatológicos em que está envolvida como, indução de apoptose, citotoxicidade, indução e/ou inibição de agregação plaquetária, hemorragia, hemólise, edema, atividade bactericida, leishmanicida, anti-HIV, entre outros. As LAAOs isoladas e caracterizadas de venenos de serpentes tornaram-se importantes alvos de pesquisa, devido ás suas possíveis aplicações biotecnológicas, na busca de novos fármacos de interesse na clínica médica e científica. O principal objetivo deste projeto é caracterizar funcionalmente a L-aminoácido oxidase de Calloselasma rhodostoma (CR-LAAO) a fim de avaliar a ação dessa proteína no processo inflamatório, na atividade antiparasitária (tripanomicida e leishmanicida), fungicida, bactericida e citotóxica sobre as células tumorais HL-60 e HEPG2 e células normais PBMC. Outros parâmetros para análise de indução de células apoptóticas serão avaliados pela metodologia de citometria de fluxo, além da análise da atuação dessa toxina sobre o ciclo celular. Em sequência, serão verificadas as vias de atuação da CR-LAAO frente aos estudos de expressão gênica, caracterizando as vias de apoptose mediadas pelos genes pró-apoptóticos Bax, Fas e o gene anti-apoptótico Bcl-2, utilizando a metodologia de PCR em tempo real. Este estudo permitirá a melhor compreensão dos diversos mecanismos de ação que envolvem esta enzima multifuncional e abrirá perspectivas para uma possível utilização desta proteína como modelo molecular e para o desenvolvimento de novos fármacos para aplicações terapêuticas.

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Scientific publications
(The scientific publications listed on this page originate from the Web of Science or SciELO databases. Their authors have cited FAPESP grant or fellowship project numbers awarded to Principal Investigators or Fellowship Recipients, whether or not they are among the authors. This information is collected automatically and retrieved directly from those bibliometric databases.)
COSTA, TASSIA R.; MENALDO, DANILO L.; DA SILVA, CASSIO PRINHOLATO; SORRECHIA, RODRIGO; DE ALBUQUERQUE, SERGIO; PIETRO, ROSEMEIRE C. L. R.; GHISLA, SANDRO; ANTUNES, LUSANIA M. GREGGI; SAMPAIO, SUELY V.. Evaluating the microbicidal, antiparasitic and antitumor effects of CR-LAAO from Calloselasma rhodostoma venom. International Journal of Biological Macromolecules, v. 80, p. 489-497, . (11/23236-4, 11/02645-3)
COSTA, TASSIA R.; BURIN, SANDRA M.; MENALDO, DANILO L.; DE CASTRO, FABIOLA A.; SAMPAIO, SUELY V.. Snake venom L-amino acid oxidases: an overview on their antitumor effects. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 20, . (11/02645-3, 12/11963-1, 11/23236-4)
Academic Publications
(References retrieved automatically from State of São Paulo Research Institutions)
COSTA, Tássia Rafaella. Functional characterization and study of the mechanisms of response to the cellular damage caused by an L-amino acid oxidase from Calloselasma rhodostoma in human cell lines. 2014. Doctoral Thesis - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.