Characterization of the role of Schwann cells on the neurodegeneration events of motoneurons in the animal model an in patients with the amyotrophic lateral sclerosis: in vitro study

• Grant number: 10/20467-2
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Doctorate (Direct)
• Start date: June 01, 2011
• End date: August 31, 2015
• Field of knowledge: Health Sciences - Medicine
• Principal Investigator: Gerson Chadi
• Grantee: Chrystian Junqueira Alves
• Host Institution: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil

Abstract

A Esclerose Lateral Amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa progressiva e de evolução rápida, caracterizada pela perda seletiva dos neurônios motores superiores e inferiores, levando à fraqueza, atrofia muscular, paralisia e morte em 3-5 anos. Componente hereditário aparece em 10% dos casos, dos quais 20% são mutações no gene da superóxido dismutase 1 (SOD1), sendo os demais classificados como forma esporádica. O modelo experimental mais utilizado é o camundongo transgênico que carrega a SOD1 humana mutante (G93A). Os mecanismos celulares responsáveis pela morte do neurônio motor ainda são pouco conhecidos e, consequentemente, não existe um tratamento eficaz para os pacientes com ELA. Estudos recentes demonstraram que as células gliais centrais possuem um papel importante no processo neurodegenerativo, entretanto os mecanismos moleculares subjacentes carecem de esclarecimentos. O fato de a denervação periférica ser o evento inicial predominante na ELA abriu a possibilidade a que as células de Schwann, na periferia, possam também participar da fisiopatologia da doença. Este estudo propõe-se a avaliar a natureza molecular da influência destas células obtidas de camundongos transgênicos SOD1G93A na fase pré-sintomática e do nervo periférico de pacientes com ELA esporádica de evolução recente. A toxicidade neurônio-glial será avaliada em sistemas de co-culturas célula de Schwann/neurônio motor, estes obtidos da medula espinal do animal neonato. Experimentos envolvendo a realização de microarranjos de DNA (microarray) e validações pelo PCR em tempo real nos nervos do modelo animal e pacientes serão realizadas em outro subprojeto sob responsabilidade de um aluno de doutorado do laboratório, possibilitarão a eleição de 20 moléculas candidatas. A expressão gênica destas moléculas será estudada, também por PCR em tempo real, nas células de Schwann especificamente marcadas e microdissecadas a laser, uma a uma, dos nervos (subprojeto paralelo) e também nas células de Schwann cultivadas. Após esta etapa, 5 moléculas serão eleitas para avaliação da sua presença e quantidade nos meios condicionados dos sistemas de culturas pelo método do ELISA sanduíche. Ao final, a possível influencia tóxica das células de Schwann aos neurônios motores na ELA e os mecanismos moleculares implicados terão sido esclarecidos, abrindo a possibilidade da análise da reversão do fenótipo (neuroproteção) em nossos futuros projetos envolvendo RNA de interferência e proposição de alvos terapêuticos eficazes ao controle da progressão ou mesmo reversão da doença. (AU)

Academic Publications

(References retrieved automatically from State of São Paulo Research Institutions)

ALVES, Chrystian Junqueira. Characterization of Schwann cell role in the motor neuron neurodegeneration process in amyotrophic lateral sclerosis in the transgenic animal model and in the peripheral nerve of patients: in vitro study. 2015. Doctoral Thesis - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM/SBD) São Paulo.