Platform for Providing Advanced Services in Flow Cytometry

• Grant number: 25/06005-1
• Support Opportunities: Scholarships in Brazil - Technical Training Program - Technical Training
• Start date: April 01, 2025
• End date: January 31, 2026
• Field of knowledge: Interdisciplinary Subjects
• Principal Investigator: Niels Olsen Saraiva Câmara
• Grantee: Caroline Martins de Matos
• Host Institution: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brazil
• Associated research grant: 22/11306-2 - Cientific EMU: purchase of functionally coupled flow cytometers to a facility of the Instituto de Ciências Biomédicas, USP, AP.INFRA7.CI

Abstract

A citometria de fluxo vive hoje o auge dos avanços em sua evolução tecnológica e aplicação nas mais diversas áreas das ciências biológicase biomédicas. Trata-se de uma ferramenta para o estudo morfológico, fenotípico e funcional de células e partículas através da detecção dadispersão da luz e da fluorescência emitidas por moléculas (fluorocromos) associadas às mesmas e pode ser aplicada em estudos deavaliação funcional e diferenciação de populações celulares; conteúdo de DNA e RNA; atividades enzimáticas; apoptose; produção de íons;citotoxicidade; modulação de receptores; distribuição populacional; produção de citocinas, entre outros. A citometria de fluxo permiteainda a separação rápida e purificada de uma suspensão heterogênea de células ou partículas, por um processo denominado Sorting.Avanços recentes no desenvolvimento de novos sistemas de detecção da fluorescência, assim como de novos fluorocromos, permitiramum salto tecnológico e a implementação da citometria de fluxo espectral que possibilitou avaliação de 50 parâmetros de fluorescênciasimultaneamente, podendo atingir até 80. Neste contexto, foi desenvolvido o BD-FACSDiscover" S8 Cell Sorter, que é o primeiro eatualmente único citômetro capaz de isolar populações celulares com base em citometria de fluxo espectral e também na avaliação espaciale morfológica da distribuição de fluorescência em tempo real, produzindo uma imagem da célula analisada e a possibilidade de sevislumbrar não apenas a positividade para um determinado marcador, como também a localização espacial deste. Este citômetro trabalhaem sinergia com uma série de equipamentos essenciais para a pesquisa biomédica, como sequenciadores de alto rendimento, citômetrosespectrais de alta performance, sistema de cultura celular 2D e 3D, sistemas de análise metabólica celular de alto rendimento. A propostaprincipal ao qual este pedido de bolsista TT3 está vinculada, inclui o pedido de um o BD-FACSDiscover" S8 Cell Sorter, que será instaladona facility FLUIR-CEFAP, centro multiusuário especializado no fornecimento de serviços de citometria de fluxo para a comunidade científica.A aquisição deste equipamento demandará a necessidade de treinamento de usuários e fornecimento de serviço especializado.Recentemente, a facility tem se deparado com o desafio do crescente número de usuários com pouca familiaridade com o método ou cominteresse por técnicas mais avançadas, particularmente em análise dos dados obtidos. Com o intuito de suprir esta demanda estamostrabalhando em um projeto de ampliação do catálogo de serviços prestados, incluindo a implantação de protocolos de marcação eisolamento de células por citometria de fluxo, montagem de painéis de fluorocromos e uso de algoritmos para análise de dados. Dessaforma, o beneficiário da bolsa TT4 irá trabalhar em consonância com a equipe da facility para a manutenção do equipamento, treinamentode usuários, assim como na implementação desta plataforma de serviços avançados em citometria até então inédita e que irá elevar aInstituição e os seus usuários internos e externos a um novo nível de interdisciplinaridade em pesquisa com maior visibilidade e impactointernacional.