Avaliação das alterações de Metilação do DNA na obesidade induzida por dieta hiperlipídica e o possível efeito modulador dos ácidos graxos ômega-3 in vivo

Resumo

A obesidade é uma doença crônica e resulta de interações complexas entre o genoma e fatores ambientais. A metilação do DNA pode ser modulada por estes fatores, entre eles a dieta, e o processo inflamatório crônico resultante da exposição à dieta hiperlipídica (DHL) favorece a instabilidade genômica. O presente trabalho tem como objetivo identificar as alterações de instabilidade genômica e de metilação do DNA presentes na obesidade e diabetes experimental induzida pela DHL e determinar o efeito da suplementação com ácidos graxos (AG) ômega-3, assim como a participação da via de ativação de TNF-alfa. Serão utilizados camundongos das linhagens C57BL/6 e knockout para o receptor-1 de TNF-alfa (TNF-R1 -/-). Os animais serão subdivididos em dois grupos que receberão dieta DHL ou dieta balanceada por 8 e 16 semanas. Para avaliar o efeito dos AG ômega-3, os animais serão suplementados com óleo de peixe iniciando-se 4 semanas antes da exposição à DHL. Será coletado sangue periférico da cauda para a avaliação da responsividade a insulina e análise de instabilidade genômica pelo teste do micronúcleo e ensaio do cometa. Os tecidos hepático, muscular esquelético e adiposo serão utilizados para análise de metilação global do DNA genômico, metilação específica da região promotora associada à expressão de RNAm dos genes envolvidos respectivamente no mecanismo de ação dos AG e processo inflamatório (Pparg e Tlr4), e análise da expressão das DNA metiltransferases. A instabilidade genômica e a metilação do DNA na obesidade e diabetes experimental ainda são pouco exploradas. Portanto, o presente estudo contribuirá para elucidar qual o envolvimento dessas alterações no desenvolvimento da obesidade e diabetes induzida pela ingestão de dieta desbalanceada com excesso de gordura. Esta dieta associada à falta de atividade física da vida moderna é o principal fator de risco que favorece o desenvolvimento de obesidade e doenças associadas. (AU)