Avaliação da terapia fotodinâmica contra biofilmes acneicos polimicrobianos: um estudo pré-clínico

Resumo

A acne vulgar é uma das doenças dermatológicas mais comuns encontradas na prática clínica. As opções de tratamento para esta dermatose são diversas, porém nem sempre são efetivas. A resistência microbiana frente aos antibióticos e os efeitos adversos das terapias convencionais têm feito pesquisadores investigarem tratamentos alternativos. A fototerapia e mais recentemente a terapia fotodinâmica vem sendo utilizadas visando inativar as bactérias causadoras da acne, otimizar as terapias já existentes e reduzir os efeitos colaterais. Neste contexto, o objetivo deste estudo será dividido em três etapas. A primeira consistirá na análise da ação fotodinâmica mediada por curcumina, azul de metileno e clorina-e6 contra biofilmes polimicrobianos formados a partir de amostras extraídas de pacientes portadores de acne vulgar moderada e severa, realizando quatro aplicações. Na segunda etapa, será feita a identificação biomolecular das amostras coletadas e por fim, na terceira etapa, será avaliada a citotoxicidade dos tratamentos propostos em um modelo in vitro de epiderme. A viabilidade microbiana após os tratamentos propostos será quantificada por unidades formadoras de colônias por mililitro de amostra (UFC/mL) e por Microscopia de Fluorescência Confocal (MFC). Adicionalmente, esta mesma técnica (MFC) permitirá o estudo da internalização dos fotossensibilizadores e de danos na matriz do biofilme. A identificação biomolecular dos micro-organismos presente nas amostras será feita por meio da realização de qPCR. A toxicidade da terapia fotodinâmica sobre modelos de epiderme humana será avaliada por meio do teste de Alamar Blue. Espécies reativas de oxigênio intracelular, produção de citocinas pró e antiinflamatórias e análises histológicas também serão investigadas. As avaliações dos resultados serão feitas pelos métodos estatísticos mais adequados de acordo com cada metodologia empregada.