Modulação da proteína transportadora de glicose glut4 pelo receptor canabinóide cb1 em adipócitos 3t3-l1 e tecido adiposo visceral de camungos obesos

• Processo: 08/09194-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2009
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Ubiratan Fabres Machado
• Beneficiário: Daniela Tomie Furuya
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 12/04831-1 - Novos moduladores do controle glicêmico e do desenvolvimento de complicações crônicas no Diabetes mellitus: perspectivas preventivas e terapêuticas, AP.TEM
• Assunto(s): Tecido adiposo Transportador de glucose tipo 4 NF-kappa B Endocrinologia Obesidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: endocanabinóide | Glut4 | NF-kB | obesidade | Srebp | Tecido adiposo | Endocrinologia

Resumo

Na obesidade, o sistema endocanabinóide parece estar hiper ativado, resultando em aumento dos níveis de endocanabinóides tanto na circulação quanto no tecido adiposo visceral. O receptor canabinóide CB1 além de ser expresso no cérebro, é encontrado em tecido adiposo e músculo esquelético. Raros estudos in vitro sugerem que a ativação de CB1 resulte em aumento da captação de glicose em adipócitos. No entanto, nada se sabe a respeito do efeito dessa ativação sobre a expressão da proteína transportadora de glicose GLUT4 e nem dos possíveis fatores de transcrição envolvidos. Adicionalmente, não se conhece as ações de CB1 sobre os fatores NF-kB e SREBP em adipócitos. Dessa maneira, esse projeto tem como objetivo verificar a modulação da expressão de GLUT4, bem como o envolvimento dos fatores NF-kB e SREBP, pelo receptor canabinóide CB1 em cultura de adipócitos e camundongos obesos por glutamato monossódico (MSG). Para tanto, adipócitos da linhagem 3T3-L1 serão tratados por 24 e 48 horas com agonista seletivo do receptor CB1 (aracdonoil-2-cloro-etilamida), e/ou antagonista seletivo do receptor CB1 (AM251). Para estudo dos fatores de transcrição, as células serão previamente tratadas com inibidor de NF-kB (SN50), e/ou inibidor de SREBP (25-hidroxicolesterol). Paralelamente, camundongos controles e obesos serão tratados por 10, 20 ou 30 dias com antagonista seletivo CB1 (rimonabant) a fim de verificar o melhor tempo de tratamento para a melhora da resistência à insulina in vivo, que será avaliado por Teste de Tolerância à Insulina Intravenoso. Tanto em células como em tecido adiposo periepididimal de animais obesos tratados serão analisados: (1) expressão gênica de GLUT4, por Northern blotting, (2) expressão da proteína GLUT4, por Western blotting, (3) expressão gênica de SREBP-1c por RT-PCR semi-quantitativo e (4) ativação de NF-kB e SREBP-1c na região promotora do gene GLUT4, por Ensaio de Mobilidade Eletroforética (EMSA). Com esses estudos espera-se determinar o papel do receptor CB1 na regulação do GLUT4, e sua contribuição na resistência à insulina do tecido adiposo.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FURUYA, D. T.; NERI, E. A.; POLETTO, A. C.; ANHE, G. F.; FREITAS, H. S.; CAMPELLO, R. S.; REBOUCAS, N. A.; MACHADO, U. F.. Identification of nuclear factor-kappa B sites in the Slc2a4 gene promoter. Molecular and Cellular Endocrinology, v. 370, n. 1-2, p. 87-95, MAY 6 2013. (07/50554-1, 11/08570-5, 08/09194-4)

FURUYA, D. T.; POLETTO, A. C.; FREITAS, H. S.; MACHADO, U. F.. Inhibition of cannabinoid CB1 receptor upregulates Slc2a4 expression via nuclear factor-kappa B and sterol regulatory element-binding protein-1 in adipocytes. JOURNAL OF MOLECULAR ENDOCRINOLOGY, v. 49, n. 2, p. 97-106, OCT 2012. (07/50554-1, 08/09194-4)

FURUYA, DANIELA T.; POLETTO, ANA C.; FREITAS, HELAYNE S.; MACHADO, UBIRATAN F.. The Inhibition of Cannabionoid Receptor CB1 Increases GLUT4 Expression in Adipocytes and Adipose Tissue. Diabetes, v. 60, p. 1-pg., 2011-07-01. (08/09194-4, 07/50554-1)