Avaliacao dos mecanismos basicos de ativacao via receptores semelhantes ao toll 4 (tlr-4) em monocitos de recem nascidos a termo e pre-termo.

Resumo

A susceptibilidade do neonato à invasão de patógenos está relacionada, em parte, a imaturidade funcional da resposta imune. Uma ativação eficiente de linfócitos T neonatais requer a ativação de células apresentadoras de antígenos (APCs), como células dendríticas, monócitos ou macrófagos e linfócitos B, a qual envolverá a indução da expressão de moléculas co-estimulatórias, assim como a produção de diversas citosinas. O lipopolissacarídeo (LPS) de bactérias Gram-negativas, reconhecido pelo TLR4, que induz à ativação de diversas proteínas intracelulares e a translocação de diferentes fatores de transcrição que são essenciais para a expressão dos genes que mediam a resposta inflamatória. Recentes estudos sugerem que a imaturidade do sistema imune adaptativo ao nascimento envolve alterações funcionais das APCs. Desta forma, o objetivo deste trabalho consiste em avaliar a ativação e resposta de células mononucleares totais, monócitos e células dendríticas derivadas de monócitos (MDDCs) do sangue de cordão umbilical de recém-nascidos a termo e pré-termos saudáveis, bem como do sangue de suas respectivas mães, após a estimulação do TLR4 com LPS. Serão coletadas 15 amostras de sangue de cordão umbilical de recém-nascidos a termo; 15 amostras de sangue de cordão de recém-nascidos pré-termo com idade gestacional abaixo de 34 semanas e; 15 amostras de sangue de cordão de recém-nascidos pré-termo com idade gestacional entre 34 e 36 6/7 semanas, todos saudáveis com peso adequado para a idade gestacional. Os níveis séricos de citosinas pró-inflamatórias e antiinflamatórias e os níveis das populações leucocitárias no sangue de cordão umbilical serão avaliados por citometria de fluxo. A atividade funcional dos fagócitos será determinada pelo teste de avaliação da função fagocítica e atividade microbicida. A partir da cultura de células mononucleares, de monócitos e de MDDCs de sangue de cordão, estimulados via TLR-4 com LPS serão determinados os níveis de expressão protéica e gênica das citosinas pró-inflamatórias e antiinflamatórias e a expressão protéica de moléculas envolvidas na via de sinalização intracelular do TI R-4 (AU)