Influencia da modificacao in vivo da albumina no diabete melito sobre o estresse oxidativo e o estresse do reticulo endoplasmatico em macrofagos - impacto sobre a remocao de colesterol celular

Resumo

Produtos avançados de glicação (AGE) associam-se independentemente com o desenvolvimento da doença macrovascular aterosclerótica. Os AGE aumentam a produção de espécies reativas de oxigênio em macrófagos, o que se associa com a redução do receptor ABCA-1 e prejuízo na remoção de colesterol pelas HDL. Considerando-se que não é observada redução no RNA mensageiro do ABCA-1, frente à glicoxidação celular, é possível que vias associadas ao estresse do retículo endoplasmático (RE) e à ativação do sistema de degradação proteosomal estejam envolvidas com a degradação pós-traducional do ABCA-1. O objetivo deste estudo é avaliar a influência da albumina modificada in vivo, isolada do soro de portadores de DM com controle gücêmico inadequado (HbA1c > 7,5%) sobre a expressão, em macrófagos, de proteínas marcadoras do estresse do RE - chaperonas Grp78, Grp94 e calreticulina - e da proteína dissulfeto isomerase (PDI), a qual atua como sensor do desbalanço redox intracelular. Além disso, será determinada a expressão de ubiquitina, com o marcadora de ativação proteasojnal. Macrófagos de peritônio de camundongo serão incubados com albumina (alb) isolada do soro de portadores de DM1, DM2 e controles saudáveis (C) por cromatografia líquida (FPLC), seguindo-se purificação por extração alcoólica. A expressão de proteínas marcadoras de estresse de RE e desbalanço redox será determinada por imunoblot. (AU)