Avaliação da via Wnt/{beta}-catenina em tumores adrenocorticais da criança

Resumo

Contexto: A incidência de tumores adrenocorticais (TAC) é 10-15 vezes mais elevada em crianças das regiões Sul e Sudeste do Brasil que em outros lugares do mundo. Os mecanismos envolvidos na formação e progressão dos TAC ainda não são complemente conhecidos. A ativação da via Wnt/{beta}-catenina é frequente em TAC de pacientes adultos e geralmente decorrente de mutações no gene CTNNB1. Em estudo prévio, observamos indícios de ativação freqüente da via Wnt/{beta}-catenina em TAC pediátricos, apesar da baixa freqüência de mutações no gene CTNNB1. Observou-se também redução da expressão de genes inibidores da via Wnt, como os genes DKK3, SFRP1 e AXIN1 nestes tumores. Estes dados geraram a hipótese de que a redução da expressão destes genes inibidores pode resultar em ativação da via Wnt/{beta}-catenina nestes tumores. É possível que outros mecanismos além de mutações no gene CTNNB1 resultem em ativação da via Wnt/{beta}-catenina e participar do processo de tumorigênese adrenocortical. Objetivos: Avaliar o papel da via Wnt/{beta}-catenina no desenvolvimento de TAC da criança. Material e Métodos: Em TAC pediátricos (n=62) e linhagens celulares de córtex adrenal (Y1, H295 e culturas primárias de TAC pediátricos) avaliaremos a expressão de genes da via Wnt/{beta}-catenina por meio de qPCR, imunoistoquímica, imunocitoquímica e western blot. Em experimentos in vitro, por meio de silenciamento gênico com siRNA, analisaremos o envolvimento dos genes CTNNB1 e DKK3 na ativação da via Wnt/{beta}-catenina em TAC. Avaliaremos o padrão de metilação do gene DKK3 e sua possível associação com o padrão de expressão deste gene e a ativação desta via nestes tumores. Adicionalmente, analisaremos a interação do microRNA-449 com o gene AXIN1 e seu papel ativação da via Wnt/{beta}-catenina nos TAC por meio da hiperexpressão deste microRNA nestas linhagens celulares. Perspectivas: Os resultados deste trabalho poderão contribuir para o esclarecimento do papel da via Wnt/{beta}-catenina na tumorigênese adrenocortical.