Alterações na composição de microRNAs em macrófagos infectados por Leishmania amazonensis

Resumo

O projeto está baseado na hipótese de que a composição de miRNA do hospedeiro seja modificada durante a entrada e replicação da Leishmania amazonensis no macrófago, como meio de subverter a resposta imune do hospedeiro. Deste modo, a alteração na expressão de alguns miRNAS, envolvidos no controle pós-transcricional da sinalização intracelular das vias dos receptores da imunidade inata, TLRs, na maturação do fagolisossomo e ativação da produção de citocinas e iNOS (NF-ºB), auxiliariam a manutenção do parasita no vacúolo endocítico, ao mesmo tempo que diminuiria a interação com o fagolisossomo, portanto sua replicação no macrófago aumentaria a infectividade deste parasita. A composição de miRNAs em processos infecciosos causados por bactérias e vírus, assim como de células cancerígenas, vem sendo intensamente estudada nos últimos anos, mas a composição de miRNAs durante a infecção por Leishmania não foi estudada anteriormente. Este projeto tem como objetivo central avaliar as alterações na composição de microRNAs em macrófagos infectados por L. amazonensis e suas implicações na regulação de vias relacionadas a fagocitose, permanência do parasita no fagolisossomo e sua replicação, bem como diminuição na resposta de produção de iNOS e citocinas, utilizando L. amazonensis selvagens e nocaute para arginase (menor infectividade), macrófagos selvagens e nocaute para MyD88 (mais susceptíveis a infecção) ou tratados com melatonina (maior capacidade fagocíticas) ou knockdown para as subunidades do NF-ºB, e os miRNAs que tiverem sua transcrição alterada e que possuam relevância para as vias estudadas serão utilizados como "candidatos" no estudo de silenciamento de sua expressão e impacto na infectividade. (AU)